Skip to main content

Login for students

Login for employees

Publication detail

Ampérometrická detekce salmonel s použitím různých kombinací pufr/enzymatický substrát
Authors: Hrubeš Michal | Klodová Kateřina | Vytřasová Jarmila | Vytřas Karel
Year: 2008
Type of publication: článek ve sborníku
Name of source: Sborník příspěvků ze semináře X. Monitorování cizorodých látek v životním prostředí
Publisher name: Univerzita Pardubice
Place: Pardubice
Page from-to: 129-138
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Ampérometrická detekce salmonel s použitím různých kombinací pufr/enzymatický substrát Cílem práce je navrhnout nejvýhodnější kombinaci pufru a enzymatického substrátu pro amperometrickou metodu (AD) stanovení mikroorganismů na základě detekčního limitu (LOD) a meze stanovení (LOQ) pro jednoho ze zástupců patogenních bakterií v potravinách (Salmonella Enteritidis). Pro studii byly vybrány čtyři různé pufry (uhličitanový pufr, TBS, DEA, B-R) a dva enzymatické substráty (fenylfosfát, 1-naftylfosfát). Princip detekce salmonely je založen na enzymatické aktivitě enzymu alkalické fosfatázy, který je součástí imunokomplexu složeného z enzymu-protilátky-bakterie. Enzym umožňuje přeměnit enzymatický substrát na elektrochemicky aktivní produkt (fenol, 1-naftol). Námi navrženou kombinací amperometrické metody, pufru a enzymatického substrátu jsme schopni detekovat již 2,4x103 buněk/ml salmonel v BHI kultivačním mediu. amperometrická detekce, Salmonella
eng Amperometric detection of Salmonella ? The Study of Different Technique/Buffer/Substrate Combinations The aim of the work is to propose the most suitability combination of buffer and enzymatic substrate for amperometric method (AD) used for detection of microorganisms regarding to limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) for Salmonella Enteritidis as an representative of pathogen bacteria in food. Four different buffers (carbonate buffer, TBS, DEA, B-R) and two different enzymatic substrates (phenyl phosphate, 1?naphthyl phosphate) were studied. The principle of detection is based on enzymatic activity of alkaline phosphatase enzyme a component of enzyme-antibody-bacteria immunocomplex, which provides the change of enzymatic substrate to electrochemical active product (phenol, 1-naphthol). We are able to detect 2,4x103 CFU/ml of Salmonella Enteritidis in BHI using our proposed combination of amperometric method, buffer and enzymatic substrate. Amperometric detection, Salmonella