Login for students

Login for employees

Publication detail

Enzyme-Linked Electrochemical Detection of PCR-Amplified Nucleotide Sequences Using Disposable Screen-Printed Sensors. Applications in Gene Expression Monitoring
Authors: Horáková Petra | Fojtová Miloslava | Vytřas Karel | Fojta Miroslav
Year: 2008
Type of publication: článek v odborném periodiku
Name of source: Sensors
Publisher name: Molecular Diversity Preservation International
Place: Basel
Page from-to: 193-210
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Imunoelektrochemická detekce nukleotidových sekvencí po PCR s využitím jednorázových tištěných senzorů. Uplatnění při monitorování exprese genů Jsou představeny imunoelektrochemické techniky pro sledování specifických sekvencí DNA. Tyto techniky jsou založeny na navázání konjugátu streptavidin-alkalická fosfatáza na biotinové značky DNA, imobilizované na povrch jednorázových uhlíkových tištěných elektrod (SPCE) s následnou produkcí a electrochemickým stanovením elektroaktivního indikátoru 1-naftolu. Bylo dosaženo vysoce specifického rozlišení mezi komplementárními a nekomplementárními nukleotidovými sekvencemi hybridizací imobilizované DNA s biotinem značenými sondami. Hybridizační stanovení s využitím imunoenzymové reakce bylo úspěšně využito při analýze sekvencí genomické DNA po aplikaci PCR techniky a při sledování exprese genů v rostlinách. Dále byl představen další způsob specifické inkorporace biotinem značených nukleotidů do DNA pomocí techniky primer extension. Zavedení několika biotinových značek na sondu primeru významně zvýšilo intenzitu signálu a zlepšilo specifitu stanovení. elektrochemická detekce;stanovení s využitím enzymu;hybridizace DNA;prodloužení primeru;PCR;exprese genu
eng Enzyme-Linked Electrochemical Detection of PCR-Amplified Nucleotide Sequences Using Disposable Screen-Printed Sensors. Applications in Gene Expression Monitoring Electrochemical enzyme-linked techniques for sequence-specific DNA sensing are presented. These techniques are based on attachment of streptavidin-alkaline phosphatase conjugate to biotin tags tethered to DNA immobilized at the surface of disposable screen-printed carbon electrodes (SPCE), followed by production and electrochemical determination of an electroactive indicator, 1-naphthol. Via hybridization of SPCE surface-confined target DNAs with end-biotinylated probes, highly specific discrimination between complementary and non-complementary nucleotide sequences was achieved. The enzyme-linked DNA hybridization assay has been successfully applied in analysis of PCR-amplified real genomic DNA sequences, as well as in monitoring of plant tissue-specific gene expression. In addition, we present an alternative approach involving sequence-specific incorporation of biotin-labeled nucleotides into DNA by primer extension. Introduction of multiple biotin tags per probe primer resulted in considerable enhancement of the signal intensity and improvement of the specificity of detection. electrochemical detection;enzyme-linked assay;DNA hybridization;primer extension; PCR;gene expression

Departments

Other Parts

Map

en.mapy.cz

Services

Popular Links

© 2023 University of Pardubice, Studentská 95, 532 10 Pardubice 2
Phone: +420 466 036 111, 466 036 112, 466 036 113
Webmaster, RSS
Data box ID: f5vj9hu
Accessibility Statement
CC BY-NC-ND 4.0Creative CommonsAttributionNonCommercialNoDerivatives