University of PardubiceFaculty of Chemical Technology

University

Employees
|
Students
Česky

Publication detail

ZMĚNY ANTIOXIDAČNÍ KAPACITY V KULTIVOVANÝCH HEPATOCYTECH BĚHEM TOXICKÉHO PŮSOBENÍ ACETAMINOFENU.

Authors: Roušar Tomáš | Kučera Otto | Křiváková Pavla | Lotková Halka | Mužáková Vladimíra | Červinková Zuzana

Year: 2007

Type of publication: ostatní - přednáška nebo poster

Page from-to: nestránkováno

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
cze	ZMĚNY ANTIOXIDAČNÍ KAPACITY V KULTIVOVANÝCH HEPATOCYTECH BĚHEM TOXICKÉHO PŮSOBENÍ ACETAMINOFENU.	Úvod: Toxické působení acetaminofenu je nejčastější příčinou akutního jaterního selhání, a proto je studiu mechanismů jeho účinků stále věnována značná pozornost. Principem toxického působení acetaminofenu je jeho přeměna pomocí cytochromu P450 na vysoce reaktivní formu, tzv. NAPQI-radikál (N-acetyl-p-benzochinonimin), jenž je schopen reakce s řadou látek. NAPQI je za fyziologického stavu detoxikován konjugací s glutathionem (GSH), a proto je působení acetaminofenu provázeno poklesem intracelulární hladiny GSH. Při převýšení detoxikační kapacity glutathionu se NAPQI váže na různé proteiny, což má za následek poškození buněk. Charakteristickým nálezem pro toxické poškození acetaminofenem je vznik centrilobulární nekrózy. Cíl: Naším cílem bylo kromě stanovení hladin obou forem glutathionu stanovit také aktivitu glutathionreduktasy, která zodpovídá za zpětnou tvorbu redukované formy GSH a může tedy významně přispívat k odolnosti buněk vůči toxickému poškození. Testování bylo prováděno s ohledem na koncentraci acetaminofenu a časovou závislost působení. Metody: Hepatocyty jsme izolovali z potkaních samců kmene Wistar (220 g ? 260 g) metodou dvoustupňové perfúze pomocí kolagenasy. Hepatocyty byly kultivovány na Petriho miskách potažených kolagenem a následně byly vystaveny působení acetaminofenu v různých koncentracích (1 ? 15 mM). Zároveň byla testována časová závislost působení, kdy byly buňky inkubovány s acetaminofenem po různě dlouhou dobu (4, 8, 12, 24 hod). Hladiny glutathionu byly stanoveny s využitím HPLC metody, glutathionreduktasa byla stanovena spektrofotometricky. Závěr: Byla prokázána závislost vzrůstající koncentrace acetaminofenu a poklesu hladiny glutathionu, stejně jako nepřímá úměra délky působení acetaminofenu a aktivity antioxidačního systému.
eng	Changes in antioxidant capacity in acetaminophen treated hepatocytes in culture	Changes in antioxidant capacity in acetaminophen treated hepatocytes in culture	Acetaminophen; cultured hepatocytes; hepatotoxicity