Login for students

Login for employees

Publication detail

Determination of reduced and oxidized glutathione in biological material by HPLC with electrochemical detection
Authors: Kanďár Roman | Žáková Pavla | Marková Miroslava
Year: 2007
Type of publication: článek ve sborníku
Name of source: Clinical Chemistry and Laboratory Medicine Special Supplement
Publisher name: Walter de Gruyter GmbH & Co. KG
Place: Berlin
Page from-to: S195
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Stanovení redukovaného a oxidovaného glutathionu v biologickém materiálu pomocí HPLC s elektrochemickou detekcí Úvod. Tripeptid glutathion hraje významnou úlohu v biologických systémech. Chrání před působením reaktivních sloučenin kyslíku a dusíku a podílí se na detoxikaci škodlivých sloučenin. Metody. Byla vyvinuta metoda pro stanovení jak redukovaného, tak také oxidovaného glutathionu v plné krvi a hepatocytech. Separace redukovaného a oxidovaného glutathionu byla dosažena isokratickou elucí na koloně Polaris 5u C-18A, 250 x 4,6 mm. Jako mibilní fáze byla použita směs methanolu a 25 mmol/l dihydrogenfosforečnanu sodného o pH 3,0 (6:94, v/v). Výsledky. Analytické parametry této metody jsou dostatečné. Variační koeficienty pro přesnost v sérii v plné krvi a potkanních hepatocytech byly 2,1% a 2,2% pro redukovaný a 4,7% a 4,9% pro oxidovaný glutathion. Výtěžnosti metody pro plnou krev dosahovaly těchto hodnot: 91,2% (CV 3,3%) pro redukovaný a 94,1% (CV 8,3%) pro oxidovaný glutathion. Kalibrační křivky měly lineární průběh v rozmezí (5-2000) umol/l (redukovaný glutathion) a (1-500) umol/l (oxidovaný glutathion). Pro redukovaný glutathion byl detekční limit 50 pmol, zatímco pro oxidovaný glutathion dokonce 10 pmol. Závěry. Porovnávali jsme metodu HPLC s elektrochemickou detekcí s metodou kapalinové chromatografie s detekcí fluorescenční, a to u padesáti vybraných vzorků plné krve. Lineární regrese ukazuje, že výsledky získané metodou HPLC s elektrochemickou detekcí jsou vyšší: HPLC/ED = 0,9112*HPLC/FD + 3,5230; R = 0,9917 (redukovaný glutathion) a HPLC/ED = 0,8879*HPLC/FD + 8,1521; R = 0,9911 (oxidovaný glutathion). Poděkování. Tato práce byla podpořena grantem MSM 0021627502. redukovaný a oxidovaný glutathion; kapalinová chromatografie s elektrochemickou detekcí
eng Determination of reduced and oxidized glutathione in biological material by HPLC with electrochemical detection Background. Tripeptid glutathione plays an important role in biological systems. It protects against the action of some reactive oxygen and nitrogen species and is involved in detoxication of harmful compounds. Methods. A method for determination of both reduced and oxidized glutathione in whole blood and hepatocytes has been developed and evaluated. Chromatography of both reduced and oxidized glutathione was accomplished using isocratic elution on Polaris 5u C18-A, 250 x 4.6 mm, i.d. column. The mixture of methanol and 25 mmol/L sodium dihydrogen phosphate, pH 3.0 (6:94 v/v) was used as a mobile phase. Results. The analytical performance of this method is satisfactory. The intra-assay coefficients of variation in whole blood and rat hepatocytes were 2.1% and 2.2% for reduced and 4.7% and 4.9% for oxidized glutathione. The recoveries were following: 91.2% (CV 3.3%) for reduced and 94.1% (CV 8.3%) for oxidized glutathione in the whole blood. The calibration curve was linear in the whole range tested (5-2000) umol/L for reduced glutathione and (1-500) umol/L for oxidized glutathione. The detection limit was 50 pmol for reduced and 10 pmol for oxidized glutathione. Conclusions. A comparison of the methods HPLC with electrochemical detection and HPLC with fluorescence detection was executed on the samples whole blood (n=50). Linear regression shows that results obtained by HPLC with electrochemical detection are higher: HPLC/ED = 0.9112*HPLC/FD + 3.5230; R = 0.9917 for reduced glutathione and HPLC/ED = 0.8879*HPLC/FD + 8.1521; R = 0.9911 for oxidized glutathione. This work was supported by grant MSM 0021627502. reduced and oxidized glutathione; liquid chromatography with electrochemical detetction

Departments

Other Parts

Map

en.mapy.cz

Services

Popular Links

© 2023 University of Pardubice, Studentská 95, 532 10 Pardubice 2
Phone: +420 466 036 111, 466 036 112, 466 036 113
Webmaster, RSS
Data box ID: f5vj9hu
Accessibility Statement
CC BY-NC-ND 4.0