Publication detail

Chip-based CE for rapid separation of 8-aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid (APTS) derivatized glycans

Year: 2010

Type of publication: článek v odborném periodiku

Name of source: Electrophoresis

Publisher name: Wiley-VCH

Place: Weinheim

Page from-to: 3783-3786

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
cze	Analýza na čipu pro rychlou separaci APTS uvolněných z glykanů	Fluorescenčně značené sacharidy uvolněné z glykoproteinů byly separovány na komerčně dostupném mikrofluidickém zařízení, metodou CE na čipu. Instrumentace použitá v této práci je původně určena pro analýzu DNA. Díky vývojovému softwaru, který byl poskytnut výrobcem, bylo možné přizpůsobit přístroj pro analýzu širšího spektra analytů a rozšířit tak jeho aplikakační základ. Obohacení glykoproteinů lidské plazmy bylo uskutečněno pomocí lektinové afinitní chromatografie. Glykany byly z glykoproteinů uvolněny pomocí enzymu PNGása F. Po fluorescenčním označení sacharidů aminopyrenetrisulfonovou kyselinou, bylo možné provést jejich separaci pomocí kapilární gelové elektroforézy s fluorescenční detekcí. Separace byla provedena na čipu (délka separačního kanálku- 14 mm) a byla ukončena po 40 sekundách.	APTS; Bioanalyzér; Analýza na čipu; Glykany; PSA
eng	Chip-based CE for rapid separation of 8-aminopyrene-1,3,6-trisulfonic acid (APTS) derivatized glycans	Fluorescently labeled carbohydrates released from glycoproteins were separated using commercially available microfluidic chip electrophoresis system. The carbohydrates were released by enzymatic digestion (PNGase F) from glycoproteins present in human plasma after boronic acid - lectin affinity enrichment. After fluorescent labeling with aminopyrenetrisulfonic acid (APTS) the carbohydrates were separated based on capillary gel electrophoresis mechanism and detected by a fluorescence detector using a blue (470 nm) LED. Glucose ladder carbohydrate oligomers differing by one glucose unit were baseline separated up to a 20-mer with the main limitation being the detection sensitivity. As expected the observed resolution in these experiments did not approach that of standard capillary electrophoresis with 20 times longer separation distance; however, the chip-based analysis excelled in the speed of the separation. Similar electrophoretic profiles of glycans released from plasma glycoproteins were obtained.	APTS; Bioanalyzer; Chip-based analysis; Glycans; PSA

Search

Login for students

Login for employees

Publication detail

Departments

Other Parts

Map

Services

Popular Links