Login for students

Login for employees

Publication detail

Determination of glutathione disulfide in human blood by an HPLC with fluorescence detection. Sample preparation is essential for accurate analysis.
Authors: Kanďár Roman | Žáková Pavla | Štramová Xenie | Vrbová Martina | Čandová Jarmila
Year: 2011
Type of publication: ostatní - přednáška nebo poster
Name of source: Clinical Chemistry and Laboratory Medicine Special Supplement
Publisher name: Walter de Gruyter GmbH & Co. KG
Place: Berlin
Page from-to: S840
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Stanovení glutathiondisulfidu v lidské krvi metodou HPLC s fluorescenční detekcí. Příprava vzorku je zásadní pro správnou anlýzu. Oxidace glutathionu (GSH) na glutathiondisulfid (GSSG) je hlavním problémem při stanovení GSSG. Je zde popsána metoda pro správné měření hladin GSSG metodou HPLC s fluorescenční detekcí. Testovali jsme různá antikoagulační, deproteinační a thiol-maskovací činidla. Teplota, světlo, pH, rozpuštěný kyslík ve vzorku, rozpouštědlo, iontová síla mohou mít vliv na oxidaci GSH a stabilitu GSSG. Byla studována krátkodobá a dlouhodobá stabilita GSSG ve vzorcích. Nejlepší výsledky byly dosaženy za těchto podmínek: citrát (pH 5,9) jako antikoagulační činidlo, kyselina trichloroctová s EDTA jako deproteinační činidlo a pokud byl supernatant bezprostředně derivatizován s ortho-ftaldialdehydem za vzniku vysoce stabilního tricyklického isoindolového derivátu. Tricyklický isoindolový derivát je stabilní v chlazeném autosampleru (4 °C) nejméně po dobu 12 h. Analytické parametry této metody jsou vyhovující. glutathiondisulfid; HPLC s fluorescenční detekcí; příprava vzorku; stabilita glutathiondisulfidu; oxidace glutathionu
eng Determination of glutathione disulfide in human blood by an HPLC with fluorescence detection. Sample preparation is essential for accurate analysis. Oxidation of glutathione (GSH) to glutathion disulfide (GSSG) is the major problem at measurement of GSSG. A method for the accurate measurement of GSSG by an HPLC with fluorescence detection is described. We have tested different anticoagulant agents, protein precipitants and thiol-masking agents. Temperature, light, pH, dissolved oxygen, solvent, ionic strength can influence an oxidation of GSH and a stability of GSSG too. Short-term and long-term stability of GSSG were studied. The best results were obtained under these conditions: a citrate (pH 5.9) as an anticoagulant agent, immediate addition of thiol-masking agent (N-ethylmaleimide), trichloroacetic acid with EDTA as a protein precipitant and supernatant was without delay subjected a derivatization procedure with ortho-phthaldialdehyde to form a highly stabile tricyclic isoindole derivative. Tricyclic isoindole derivative is stable on a cooled autosampler (4 °C) for at least 12 h. Analytical performance of this method is satisfactory. glutathione disulfide; HPLC with fluorescence detection; sample preparation; glutathione disulfide stability; glutathione oxidation

Departments

Other Parts

Map

en.mapy.cz

Services

Popular Links

© 2023 University of Pardubice, Studentská 95, 532 10 Pardubice 2
Phone: +420 466 036 111, 466 036 112, 466 036 113
Webmaster, RSS
Data box ID: f5vj9hu
Accessibility Statement
CC BY-NC-ND 4.0Creative CommonsAttributionNonCommercialNoDerivatives