Skip to main content

Login for students

Login for employees

Publication detail

Retention times and bandwidths in reversed-phase gradient liquid
Authors: Jandera Pavel | Kučerová Zdeňka | Urban Jiří
Year: 2011
Type of publication: článek v odborném periodiku
Name of source: Journal of Chromatography A
Publisher name: Elsevier Science BV
Place: Amsterdam
Page from-to: 8874-8889
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Retenční časy a šířky píků v gradientové eluci peptidů a proteinů Cílem této práce je využití gradientové teorie vyvinuté pro nízkomolekulární látky také pro látky vysokomolekulární a porovnání její platnosti pro popis a předpověď gradientové eluce peptidů a proteinů na různých typech HPLC kolon zahrnujících konvenční kolony plněné s celoporézním, povrchově porézním a neporézním materiálem, silikagelový monolit a organický polymerní monolit na bázi metakrylátů a styren-divinylbenzen kopolymeru. Práce se zaměřuje na zjištění matematických parametrů nutných k výpočtu gradientových elučních objemů a šířek elučních píků. V případě celoporézních materiálů je předpověď elučních dat zlepšena pokud zahrneme i stérický efekt jednotlivých látek, což není nutné u povrchově porézních nebo neporézních materiálů. Předpověď šířky píku je obtížná, protože záleží na typu kolony, látky i strmosti použitého gradientu. Na druhou stranu je ale pomocí obecně platné teorie možné odhadnout celkovou změnu gradientových parametrů a jejich vliv na šířku píku a eluční objemy. gradientová eluce;peptidy;proteiny;HPLC
eng Retention times and bandwidths in reversed-phase gradient liquid The present work overviews the attempts at implementation of the conventional gradient theory developer for low-molecular compounds to the description and prediction of gradient separations of peptides and proteins on various types of HPLC columns: conventional analytical columns packed with wide-pore fully porous, fused-core superficially porous and non-porous particles; silica-based monolithic columns and organic-polymer poly(alkylmethacrylate) and poly(styrene–divinylbenzene) monolithic columns in capillary and disc formats. The attention is focused on the determination of the parameters necessary to predict gradient retention times (volumes) and bandwidths using the theoretical model equations. The accuracy of the prediction of protein retention on totally porous columns improves if size exclusion effect is taken into account, but this is not necessary with non-porous or superficially porous particles. Gradient elution;Bandwidth;Band compression;Proteins;Peptides