Publication detail

Purified Acetaminophen-Glutathione Conjugate Is Able To Induce Oxidative Stress in Rat Liver Mitochondria

Year: 2012

Type of publication: článek v odborném periodiku

Name of source: Physiological Research

Publisher name: Fyziologický ústav AV ČR

Place: Praha

Page from-to: S103-S109

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
cze	Purifikovaný konjugát acetaminofenu a glutathionu je schopný indukovat oxidační stres v potkaních jaterních mitochondriích	Předávkování acetaminofenem je jednou z nejčastějších příčin akutního jaterního selhání. Ačkoliv je toxický mechanismus delší dobu znám, přesto zůstává přesná příčina buněčné smrti neznámá. Cílem naší práce bylo přípravit, purifikovat a otestovat jeden z metabolitů acetaminofenu (APAP-SG), který je obecně považován za netoxický. K přípravě jsme využili organickou syntézu následovanou purifikací s využitím preparativní chromatografie. Konečná čistota činila >98 %. Toxický efekt připravené látky jsme testovali na izolovaných jaterních mitochondriích s využitím ROS-sondy. Naše výsledky ukázaly, že v přítomnosti konjugátu acetaminofenu a glutathionu a substrátů pro respirační komplex I i II vzrostla produkce ROS - o 104±13 % u 1 mM APAP-SG a o 130±10 % u 5 mM APAP-SG v přítomnosti glutamátu a malátu v porovnání s kontrolami. Produkce ROS závislá na přítomnosti substrátu pro komplex II byla zvýšena 4x během inkubace s 5 mM APAP-SG. Prokázali jsme, že APAP-SG je schopný indukovat produkci ROS v mitochondriích.	Toxicita acetaminofenu; glutathion; konjugát acetaminofenu a glutathionu
eng	Purified Acetaminophen-Glutathione Conjugate Is Able To Induce Oxidative Stress in Rat Liver Mitochondria	Acetaminophen overdose is the most often cause of acute liver injury. The toxic mechanism is linked to formation of an active metabolite that reacts with glutathione generating acetaminophen-glutathione conjugate (APAP-SG). This compound has been recognized to be non-toxic generally. Our preliminary results showed, however, that APAP-SG could possess a toxic effect too. Therefore, the aim of our study was to prepare, purify and to test possible toxicity of APAP-SG. We prepared APAP-SG using organic synthesis. The conjugate was purified by preparative HPLC and its structure was confirmed using mass spectrometry. Final purity of APAP-SG was >98 %. We estimated a toxic effect of APAP-SG in isolated rat liver mitochondria using a fluorescent ROS probe. We assessed ROS production in presence of complex I or complex II substrates. The increase of ROS-dependent fluorescence in presence of glutamate/malate was 104±13 % and 130±10 % in 1 mM and 5 mM APAP-SG, respectively, in comparison with controls. ROS production related to presence of complex II substrate was enhanced 4-times in APAP-SG (5 mM) treated mitochondria (compared to controls). We conclude, we proved our hypothesis that APAP-SG conjugate is able to induce a mitochondrial impairment leading to enhanced ROS production.	Acetaminophen toxicity; Glutathione; Acetaminophen-glutathione conjugate

Search

Login for students

Login for employees

Publication detail

Departments

Other Parts

Map

Services

Popular Links