Login for students

Login for employees

Publication detail

An assay of total glutathione and glutathione disulfide in human whole blood and plasma using a high-performance liquid chromatography with fluorescence detection
Authors: Kanďár Roman | Vrbová Martina | Čandová Jarmila
Year: 2013
Type of publication: článek v odborném periodiku
Name of source: Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies
Publisher name: Taylor & Francis Ltd.
Place: Abingdon
Page from-to: 2013-2028
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Stanovení celkového glutathionu a glutathiondisulfidu v lidské plné krvi a plazmě metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí Je zde popsána metoda pro stanovení celkového glutathionu a glutathiondisulfidu v lidské plné krvi a plazmě s ohledem na vhodnou přípravu vzorků zabraňující oxidaci glutathionu a hydrolýze glutathiondisulfidu. Vzorky plné krve byly získány od skupiny dobrovolných dárců krve. Po odpovídající přípravě vzorků byl glutathion derivatizován ortho-ftaldialdehydem na stabilní, vysoce fluoreskující tricyklický derivát. Pro separaci byla použita kolona s reverzní fází a efluent byl monitorován fluorescenčním detektorem. Analytické parametry metody byly vyhovující. Hodnoty variačních koeficientů přesnosti v sérii a mezi sériemi byly pod 10 %. Výtěžnost metody pro celkový glutathion v plné krvi byl 96,1% (CV 1,4%), glutathiondisulfid v plné krvi 104,3% (CV 2,4%), celkový glutathion v plazmě 92,3% (CV 2,4%) a glutathiondisulfid v plazmě 107,4% (CV 2,6%). Nenalezli jsme mezi ženami a muži statisticky význam rozdíl v hladinách celkového glutathionu a glutathiondisulfidu. Vyvinuli jsme selektivní vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii pro stanovení celkového glutathionu a glutathiondisulfidu v plné krvi a plazmě. Propracovaná příprava vzorku zabraňuje oxidaci glutathionu a hydrolýze glutathiondisulfidu. dithiothreitol; glutathion; glutathiondisulfid; HPLC s fluorescenční detekcí; ortho-ftaldialdehyd; oxidační stres; deproteinační činidla
eng An assay of total glutathione and glutathione disulfide in human whole blood and plasma using a high-performance liquid chromatography with fluorescence detection A method is described here for the determination of total glutathione and glutathione disulfide in human whole blood and plasma with a suitable sample preparation procedure to prevent glutathione oxidation and glutathione disulfide hydrolysis. Whole blood samples were obtained from a group of blood donors. After adequate sample preparation, the samples were derivatized with ortho-phthaldialdehyde to form a stable, highly fluorescent tricyclic derivative. Reverse-phase column chromatography was used for the separation and fluorimetric detection to monitor the effluent. The analytical performance of this method was satisfactory for the determination of total glutathione and glutathione disulfide. The intra-assay and inter-assay coefficients of variation were below 10%. The recoveries were as follows: 96.1% (CV 1.4%) and 104.3% (CV 2.4%) for whole blood, 92.3% (CV 2.4%) and 107.4% (CV 2.6%) for plasma. We found no significant differences in both total glutathione and glutathione disulfide concentration between the women and men. We developed a selective high-performance liquid chromatography method for the determination of total glutathione and glutathione disulfide in human whole blood and plasma. Our sophisticated sample preparation procedure prevents significant glutathione oxidation and glutathione disulfide hydrolysis. dithiothreitol; glutathione; glutathione disulfide; high-performance liquid chromatography with fluorescence detection; ortho-phthaldialdehyde; oxidative stress; protein precipitants

Departments

Other Parts

Map

en.mapy.cz

Services

Popular Links

© 2023 University of Pardubice, Studentská 95, 532 10 Pardubice 2
Phone: +420 466 036 111, 466 036 112, 466 036 113
Webmaster, RSS
Data box ID: f5vj9hu
Accessibility Statement
CC BY-NC-ND 4.0Creative CommonsAttributionNonCommercialNoDerivatives