Publication detail

Determination of nonpolar and polar lipid classes in human plasma, erythrocytes and plasma lipoprotein fractions using ultrahigh-performance liquid chromatography-mass spectrometry

Year: 2015

Type of publication: článek v odborném periodiku

Name of source: Journal of Chromatography A

Publisher name: Elsevier Science BV

Place: Amsterdam

Page from-to: 85-91

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
cze	Stanovení nepolárních a polárních tříd lipidů v lidské plasmě, erytrocytech a lipoproteinové frakci plasmy pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií	Byla vyvinuta metoda pro separaci a kvantifikaci nepolárních tříd lipidů vyskytujících se v lidské plasmě, erytrocytech a lipoproteinové frakci plasmy pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie na normálních fázích ve spojení s hmotnostní spektrometrií. Byly separovány cholesterol estery (CE), cholesterol, triacylglyceroly (TG), regioisomery 1,2- a 1,3-diacylglyceroly a 1-monoacylglycerol za použití optimalizované mobilní fáze obsahující hexan-2-propanol-acetonitril během 18 minut. Separace studovaných vzorků, které neobsahovaly monoacylglyceroly trvala 9 minut. Polární třídy lipidů, jako jsou fosfatidylglyceroly (PG), fosfatidylethanolaminy (PE), fosfatidylcholiny (PC), sfingomyeliny (SM) a lysofosfatidylcholiny (LPC) byly separovány pomocí chromatografie hydrofilních interakcí během gradientové eluce za použití 5 mmol/L vodného octanu amonného-methanolu-acetonitrilu během 13 minut. Doplňkové informace o mastných acylových profilech po transesterifikaci celkového extraktu lipidů byla získána pomocí plynové chromatografie s plamenovým ionizačním detektorem (GC-FID). Použitelnost metody je ilustrována na vzorcích lidské plasmy, erytrocytů, vysokodenzitní lipoprotein (HDL), nízkodenzitní lipoprotein (LDL) a lipoproteinu o velmi nízké hustotě (VLDL).
eng	Determination of nonpolar and polar lipid classes in human plasma, erythrocytes and plasma lipoprotein fractions using ultrahigh-performance liquid chromatography-mass spectrometry	A novel normal-phase (NP) ultrahigh-performance liquid chromatography-mass spectrometry (UHPLC/MS) method is developed for a separation and quantitation of nonpolar lipid classes occurring in human plasma, erythrocytes and plasma lipoprotein fractions. The baseline class separation of cholesteryl esters (CE), cholesterol, triacylglycerols (TG), regioisomers of 1,2- and 1,3-diacylglycerols (DG) and 1-monoacylglycerols (1-MG) is achieved using an optimized hexane - 2-propanol-acetonitrile mobile phase within 18 min for all nonpolar lipid classes or only 9 min excluding monoacylglycerols not detected in studied samples. The determination of individual nonpolar lipid classes is performed by the response factor approach and the use of dioleoyl ethylene glycol as a single internal standard. Polar lipid classes, such as phosphatidylglycerols (PG), phosphatidylethanolamines (PE), phosphatidylcholines (PC), sphingomyelins (SM) and lysophosphatidylcholines (LPC), are separated by hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) using 5 mmol/L aqueous ammonium acetate-methanol-acetonitrile gradient within 13 minutes. The quantitation of polar lipid classes is done by a similar approach as for nonpolar lipid classes, but a different internal standard (sphingosyl PE dl 7:1/12:0) is used. The complementary information on fatty acyl profiles after the transesterification of the total lipid extract is obtained by gas chromatography with flame ionization detection (GC/FID). The applicability of developed methodology for fast and comprehensive characterization of blood lipidome is illustrated on samples of human plasma, erythrocytes, high-density lipoprotein (HDL), low-density lipoprotein (LDL) and very low-density lipoprotein (VLDL) fractions.	Lipids; Normal-phase; HILIC; Plasma, Erythrocytes; LC/MS

Search

Login for students

Login for employees

Publication detail

Departments

Other Parts

Map

Services

Popular Links