Publication detail

Applicability of linear and nonlinear retention-time models for reversed-phase liquid chromatography separations of small molecules, peptides, and intact proteins

Year: 2016

Type of publication: článek v odborném periodiku

Name of source: Journal of Separation Science

Publisher name: Wiley-VCH

Place: Weinheim

Page from-to: 1249-1257

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
cze	Využití lineárních a nelineárních retenčních modelů pro separaci malých molekul, peptidů a proteinů chromatografií v systému s obrácenými fázemi	Byla studována aplikovatelnost a prediktivní vlastnosti modelu lineárního a dvou nelineárních retenčních modelů (kvadratického a Neue modelu) na separaci malých molekul (derivátů fenolu), pepitdů a proteinů. Měření retenčních časů bylo provedeno za izokratických podmínek a v gradientovém módu s různými kombinacemi času gradientu a eluční síly rozpouštědla. Kvadratický model vykazoval nejpřesnější predikce retenčních faktorů pro malé molekuly (průměrná chyba predikce 1,5%) a peptidy (chyba predikce 2,3%). Výhodou Neueho modelu byly přesnější predikce s použitím pouze tří testovacích gradientů bez nutnosti provádět měření izokratických retenčních časů. Pro peptidy byly získány přesnější predikovaná data s využitím testovacích gradientů v kombinaci s Neueho modelem (chyba predikce <2,2%) v porovnání s izokratickými experimenty. Využití kvadratického modelu je limitováno složitou kombinací chybové a exponenciální funkce. Pro separace proteinů bylo možné využít pouze úzké retenční okno díky silnému vlivu koncentrace organického modifikátoru na retenci. Lineární chování proteinů bylo dostatečně popsáno modelem lineární solvatační síly rozpouštědla. Chyby predikce s využitím testovacích gradientů byly výrazně nižší (2,2%) než s použitím izokratických testovacích separací (3,2%).
eng	Applicability of linear and nonlinear retention-time models for reversed-phase liquid chromatography separations of small molecules, peptides, and intact proteins	The applicability and predictive properties of the linear solvent strength model and two non-linear retention-time models, i.e., the quadratic model and the Neue model, were assessed for the separation of small molecules (phenol derivatives), peptides, and intact proteins. Retention-time measurements were conducted in isocratic mode and gradient mode applying different gradient times and elution-strength combinations. The quadratic model provided the most accurate retention-factor predictions for small molecules (average absolute prediction error of 1.5%) and peptides separations (with a prediction error of 2.3%). An advantage of the Neue model is that it can provide accurate predictions based on only three gradient scouting runs, making tedious isocratic retention-time measurements obsolete. For peptides, the use of gradient scouting runs in combination with the Neue model resulted in better prediction errors (<2.2%) compared to the use of isocratic runs. The applicability of the quadratic model is limited due to a complex combination of error and exponential functions. For protein separations, only a small elution window could be applied, which is due to the strong effect of the content of organic modifier on retention. Hence, the linear retention-time behavior of intact proteins is well described by the linear solvent strength model. Prediction errors using gradient scouting runs were significantly lower (2.2%) than when using isocratic scouting runs (3.2%).	Linear solvent strength model; Method development; Neue-Kuss model; Retention-time prediction; Selectivity

Search

Login for students

Login for employees

Publication detail

Departments

Other Parts

Map

Services

Popular Links