Skip to main content

Login for students

Login for employees

Publication detail

Charakterizace potenciální plicní genotoxicity nanomateriálů in vitro
Year: 2019
Type of publication: ostatní - přednáška nebo poster
Page from-to: nestránkováno
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Charakterizace potenciální plicní genotoxicity nanomateriálů in vitro Kometová metoda se používá k molekulárně-biologické analýze genotoxicity, protože je schopna detekovat poškození DNA na úrovni jednotlivých buněk. Využívá se především pro stanovení genotoxicity chemických a biologických agens, ale můžeme ji využít i pro charakterizaci reparační aktivity buněk. V důsledku působení nejrůznějších faktorů může docházet k poškození buněčné DNA a následně mohou vznikat tzv. DNA zlomy, které pomocí kometové metody detekujeme. Princip metody spočívá ve fixaci buněk, jejich lyzaci a následné separaci v elektrickém poli, kdy využíváme záporného náboje DNA, která putuje ke kladně nabité elektrodě. Rychlost migrace je závislá na velikosti molekuly a zároveň na počtu vzniklých DNA zlomů. Výsledkem elektroforézy jednotlivých buněk s poškozenou DNA je charakteristický obraz připomínající kometu. Pomocí kometové analýzy jsme otestovali působení modelových nanomateriálů různého tvaru i původu na lidské plicní buňky A549 pocházející z alveolárního adenokarcinomu. Screening pomocí testování genotoxicity u různých druhů nanomateriálů jsme zvolili, neboť nanomateriály se často využívají jako tkáňové nosiče pro růst různých typů buněk, s předpokladem zanedbatelné či nulové cytotoxicity, kdy tyto materiály vytváří prostředí vhodné pro růst, dělení a proliferaci buněk díky mechanické podpoře či umožnění adheze buněk. V rámci naší studie jsme otestovali různé druhy komerčních (např. TiO2 P25), či de novo připravených nanomateriálů. Kometová metoda; plicní genotoxicita; nanomateriály; DNA poškození