Publication detail

Ultra-vysokoúčinná superkritická fluidní chromatografie – hmotnostní spektrometrie pro analýzu metabolitů s velkým rozsahem polarit

Authors: Antonelli Michela | Holčapek Michal | Wolrab Denise

Year: 2021

Type of publication: ostatní - přednáška nebo poster

Page from-to: nestránkováno

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
cze	Ultra-vysokoúčinná superkritická fluidní chromatografie – hmotnostní spektrometrie pro analýzu metabolitů s velkým rozsahem polarit	V této studii byla provedena analýza vybraného souboru metabolitů pokrývajícího široké rozmezí polarit (log P: -3.89 – 18.95) pomocí metody UHPSFC/MS. Jako analytická sada byla vybrána reprezentativní směs 78 chemických standardů s klinickým významem, které patří k nukleosidům, biogenním aminům, sacharidům, aminokyselinám a lipidům. Pro předběžné testování byla vyhodnocena běžná a univerzální stacionární fáze separace na bázi UHPSFC, tj. Viridis BEH kolona. Byla provedena systematická studie gradientu a procentuálního podílu vody s cílem zlepšit oddělení, rozlišení a tvar píků. Nejvyšší účinnosti separace bylo dosaženo pro režim zvýšené tekutosti, od 5% do 70% modifikátoru po dobu 8,5 minuty a poté na 100% modifikátoru až do 10,5 minuty, konstantní na 100% modifikátoru, po celkovou dobu běhu 15 minut. Optimální procento vody v modifikátoru bylo 2 %, přičemž 1 % a 5 % bylo testováno. Poté byly tyto optimalizované podmínky použity k screeningu 8 stacionárních fází s různou chemií selektorů, což umožňuje zkoumání různých interakčních mechanismů analytů se stacionárními fázemi. Bylo vyhodnoceno několik chromatografických parametrů s cílem odhadnout nejúčinnější stacionární fázi, včetně selektivity, rozlišení a asymetrického faktoru. Kolona Torus Diol umožnila odhalit celou sadu analytů a dále získat celkově nejvyšší selektivitu a rozlišení. Kromě toho byl hodnocen vliv aditivního typu v mobilní fázi na chromatografickou výkonnost. Ze srovnání získaných hodnot rozlišení a selektivity, jakož i plochy píků, výšky píků a přesnosti hmotnosti byla jako nejlepší modifikátor vybrána směs octanu amonného (30 mmol L-1) a vody (2 % v/v). Zajímavé je, že při provozu v těchto podmínkách byly dosaženy nejlepší výsledky, pokud jde o citlivost, selektivitu a tvar píků při provozu v záporném ionizačním režimu. Účinnost i citlivost ionizace byly navíc zkoumány s využitím zdrojů APCI a ESI. Celkově získané výsledky ukázaly, že používání ESI má být upřednostněno před APCI. Nakonec byly tyt

Search

Login for students

Login for employees

Publication detail

Departments

Other Parts

Map

Services

Popular Links