University of Pardubice Faculty of Chemical Technology

University

Employees
|
Students
Česky

Publication detail

Využití RP-UHPLC/MS pro vysoce spolehlivou identifikaci lipidů v lidské plazmě

Authors: Vaňková Zuzana | Peterka Ondřej | Chocholoušková Michaela | Wolrab Denise | Jirásko Robert | Holčapek Michal

Year: 2021

Type of publication: ostatní - přednáška nebo poster

Page from-to: nestránkováno

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
cze	Využití RP-UHPLC/MS pro vysoce spolehlivou identifikaci lipidů v lidské plazmě	Lipidomika si klade za cíl porozumět lipidovým strukturám a jejich funkcím v biologických systémech. Analýza lipidů je založena především na hmotnostní spektrometrii (MS) buď s přímou infuzí nebo napojenou na separační techniky, typicky s elektrosprejovou ionizací (ESI). Při ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografii (RP-UHPLC) s obrácenou fází závisí retence lipidových druhů na délce tukových acylových řetězců, počtu a poloze dvojných vazeb. Cílem této práce byl vývoj metody RP-UHPLC/MS pro vysoce spolehlivou identifikaci velkého počtu lipidů z více lipidových tříd v lidské plazmě. Metoda RP-UHPLC/MS použila kolonu C18 se sub-2-μm částicemi s celkovou dobou analýzy 25 min. Identifikační přístup byl založen na: a) hodnotách m/z, kde úplný sken a tandemová hmotnostní spektra byla měřena s využitím vysokého rozlišení hybridního analyzátoru kvadrupól – analyzátor doby letu v obou ESI režimech polarity s vysokou hmotnostní přesností (v režimu úplného skenu), b) charakteristických fragmentových iontech v MS/MS a c) pravidelnosti v chromatografických retenčních závislostech pro jednotlivé lipidy. Tato kritéria poskytují velmi vysokou úroveň spolehlivosti pro hlášené identifikace lipidů, včetně regioizomerních a jiných izobarických forem. Retenční chování jednotlivých homologních lipidových řad, podporující správnou identifikaci, bylo navíc ověřeno pomocí grafů závislostí retenčních časů na počtu uhlíků nebo počtu dvojných vazeb v mastných acylových řetězcích. Celkem bylo identifikováno 503 lipidů v 26 polárních a nepolárních lipidových třídách ve standardním referenčním materiálu NIST 1950 lidské plazmy.