Skip to main content

Login for students

Login for employees

Publication detail

Reversed-Phase Ultrahigh-Performance Liquid Chromatography–Mass Spectrometry Method for High-Throughput Lipidomic Quantitation
Year: 2024
Type of publication: kapitola v odborné knize
Name of source: Clinical Metabolomics : Methods and Protocols
Publisher name: Humana Press
Place: Totowa
Page from-to: 185-194
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzních fázích ve spojení s hmotnostní spektrometrií pro vysoce výkonnou kvantifikaci lipidomu. Metoda kapalinové chromatografie na reverzních fázích ve spojení s hmotnostní spektrometrií (RP-UHPLC/MS) je optimalizována pro kvantifikaci velkého počtu lipidových druhů v biologických vzorcích, především v lidské plazmě a séru. Pro separaci lipidů z 23 podtříd je použita C18 kolona s hybridní strukturou ethylenových můstků (BEH) o rozměrech 150 × 2,1 mm a velikosti částic 1,7 μm, přičemž celková doba analýzy činí 25 minut. Separace lipidových druhů umožňuje rozlišení izobarických a izomerních forem lipidů. Pro cílenou lipidomickou analýzu je využit trojitý kvadrupólový hmotnostní spektrometr s monitorováním více reakcí (MRM) v režimu pozitivních iontů. Data jsou vyhodnocována pomocí softwaru Skyline a koncentrace analytů jsou určovány s použitím interních standardů pro každou jednotlivou lipidovou třídu. Lipidomika; Hmotnostní spektrometrie; Plazma; Kvantifikace; Reverzní fáze; Sérum; Vysokoúčinná kapalinová chromatografie
eng Reversed-Phase Ultrahigh-Performance Liquid Chromatography–Mass Spectrometry Method for High-Throughput Lipidomic Quantitation Reversed-phase ultrahigh-performance liquid chromatography-mass spectrometry (RP-UHPLC/MS) method is optimized for the quantitation of a large number of lipid species in biological samples, primarily in human plasma and serum. The method uses a C18 bridged ethylene hybrid (BEH) column (150 × 2.1 mm; 1.7 μm) for the separation of lipids from 23 subclasses with a total run time of 25 min. Lipid species separation allows the resolution of isobaric and isomeric lipid forms. A triple quadrupole mass spectrometer is used for targeted lipidomic analysis using multiple reaction monitoring (MRM) in the positive ion mode. Data are evaluated by Skyline software, and the concentrations of analytes are determined using internal standards per each individual lipid class. High-throughput lipidomics; Mass spectrometry; Plasma; Quantitation; Reversed-phase; Serum; Ultrahigh-performance liquid chromatography