Publication detail

Simultaneous determination of phenylalanine and tyrosine levels in human blood obtained by the dried spot technique for monitoring of patients with phenylketonuria

Authors: Kopčil Michal | Kanďár Roman

Year: 2025

Type of publication: článek v odborném periodiku

Name of source: Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis

Page from-to: 116831

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
cze	Simultánní stanovení hladiny fenylalaninu a tyrosinu v lidské krvi získané technikou suché kapky pro monitorování pacientů s fenylketonurií	Monitorování pacientů s fenylketonurií (PKU) vyžaduje správné měření hladin fenylalaninu a tyrosinu v malém objemu vzorku krve získaných technikou suché kapky krve (DBS). Cílem bylo studovat vybrané parametry ovlivňující kvantitativní výsledky. Fenylalanin a tyrosin byly ze vzorků DBS extrahovány methanolem a bylo testováno 5 technik zavedení interního standardu. Hladiny fenylalaninu a tyrosinu byly měřeny v 6mm discích vyražených ze vzorku DBS, předem vyražených 9mm discích obsahujících celý vzorek DBS a v kapalné krvi krvi metodou HPLC-MS-MS. Hladiny v 6mm discích vyražených ze vzorku DBS naměřené metodou HPLC-MS/MS byly porovnány s hladinami naměřenými metodou HPLC-FLD. Analytické parametry metody jsou uspokojivé, linearita v rozsahu 25–1200 μmol/L (hodnoty LOD, LOQ a LLOQ 0,2 μmol/l, 0,5 μmol/l a 3,8 μmol/l pro fenylalanin, 0,5 μmol/l, 1,5 μmol/l a 5,1 μmol/l pro tyrosin), přesnost v sérii 1,8 %–3,7 % pro fenylalanin, 1,9 %–2,7 % pro tyrosin, přesnost mezi sériemi 4,7 %–5,9 % pro fenylalanin, 4,1 %–5,4 % pro tyrosin, výtěžnost 93,8 %–100,4 % pro fenylalanin a 93,7 %–99,1 % pro tyrosin. Byla zjištěna dobrá shoda mezi koncentracemi fenylalaninu a tyrosinu v 6mm discích vyražených ze vzorku DBS (R = 0,896, p < 0,001 a R = 0,907, p < 0,001), předem vyražených 9mm discích obsahujících celý vzorek DBS (R = 0,960, p < 0,001 a R = 0,950, p < 0,001) a kapaklné krvi, stejně jako mezi koncentracemi fenylalaninu a tyrosinu získanými metodami HPLC-MS/MS a HPLC-FLD (R = 0,968, p < 0,001 a R = 0,984, p < 0,001). Prezentovaná metoda je vhodná pro monitorování pacientů s PKU.	suchá kapka krve; kapalinová chromatografie s hmotnostní spektrometrií a fluorescenční detekcí; fenylalanin; tyrosin; parametry ovlivňující kvantitativní výsledky
eng	Simultaneous determination of phenylalanine and tyrosine levels in human blood obtained by the dried spot technique for monitoring of patients with phenylketonuria	Monitoring patients with phenylketonuria (PKU) requires accurately measuring phenylalanine and tyrosine levels in a small volume of blood samples obtained by the dried blood spot (DBS) technique. The aim was to study selected parameters influencing the quantitative results. Phenylalanine and tyrosine were extracted from DBS samples with methanol, and 5 internal standard introduction techniques were tested. Phenylalanine and tyrosine levels were measured in 6-mm discs punched from DBS, pre-punched 9-mm discs containing the entire DBS sample, and liquid blood by HPLC-MS-MS. Levels in 6-mm discs punched from DBS measured by HPLC-MS/MS were compared with those measured by the HPLC-FLD. The analytical parameters of the method are satisfactory, linearity in the range of 25–1200 μmol/L (LOD, LOQ and LLOQ values 0.2 μmol/L, 0.5 μmol/L and 3.8 μmol/L for phenylalanine, 0.5 μmol/L, 1.5 μmol/L and 5.1 μmol/L for tyrosine), within-run precision 1.8 %–3.7 % for phenylalanine, 1.9 %–2.7 % for tyrosine, between-run precision 4.7 %–5.9 % for phenylalanine, 4.1 %–5.4 % for tyrosine, recovery 93.8 %–100.4 % for phenylalanine and 93.7 %–99.1 % for tyrosine. Good agreement was found between phenylalanine and tyrosine concentrations in 6-mm discs punched from DBS (R = 0.896, p < 0.001, and R = 0.907, p < 0.001, respectively), pre-punched 9-mm discs containing the entire DBS sample (R = 0.960, p < 0.001, and R = 0.950, p < 0.001, respectively) and liquid blood, as well as between phenylalanine and tyrosine concentrations obtained by HPLC-MS/MS and HPLC-FLD (R = 0.968, p < 0.001, and R = 0.984, p < 0.001, respectively). The presented method is suitable for monitoring patients with PKU.	dried blood spot; liquid chromatography with mass spectrometry and fluorescence detection; phenylalanine; tyrosine; parameters affecting quantitative results

Search

Login for students

Login for employees

Publication detail

Departments

Other Parts

Map

Services

Popular Links