Login for students

Login for employees

Publication detail

Comprehensive Quantitative Profiling of Less Polar Lipids in Human Plasma Using Validated Reversed-Phase UHPSFC/MS/MS
Year: 2025
Type of publication: článek v odborném periodiku
Name of source: Analytical Chemistry
Page from-to: 26501-26510
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Komplexní kvantitativní profilování méně polárních lipidů v lidské plazmě pomocí validované reverzně-fázové UHPSFC/MS/MS Kvantitativní analýza lipidů je náročná vzhledem k jejich strukturní rozmanitosti a koexistenci četných izomerů v biologických vzorcích. V této práci představujeme robustní a validovanou metodu založenou na reverzní-fázové ultravysoce výkonné superkritické fluidní chromatografii spojené s tandemovou hmotnostní spektrometrií (RP-UHPSFC/MS/MS) pro vysokokapacitní profilování méně polárních lipidů v lidské plazmě. Pracovní postup přípravy vzorku zahrnuje počáteční Folchovu extrakci, následnou chemickou derivatizaci benzoylchloridem a závěrečnou kapalně–kapalnou extrakci do hexanu za účelem izolace méně polárních acylovaných analytů. Tato strategie umožňuje citlivé profilování šesti hlavních tříd lipidů (TG, DG, MG, SE, ST a FA) v pozitivním iontovém módu za méně než 18 minut. Použití dvou sériově zapojených C18 kolon poskytuje vysoké chromatografické rozlišení, dostatečné pro separaci izomerních druhů, včetně cis/trans a pozičních izomerů dvojných vazeb ve mastných kyselinách. Metoda byla důkladně validována pro pět tříd lipidů, s výjimkou volných mastných kyselin (FA), a bylo prokázáno, že zavedení reakčních faktorů je nezbytné pro přesnou kvantifikaci sterolových esterů. Celkem bylo kvantifikováno 147 lipidových druhů v lidské plazmě NIST SRM 1950, což dokládá vhodnost této metody pro rozsáhlé lipidomické studie zaměřené na méně polární lipidy. Kvantitativní profilování; Méně polární lipidy; Lidská plazma; Reverzní fáze; UHPSFC/MS/MS
eng Comprehensive Quantitative Profiling of Less Polar Lipids in Human Plasma Using Validated Reversed-Phase UHPSFC/MS/MS The quantitative analysis of lipids is challenging due to their structural diversity and the coexistence of numerous isomers in biological samples. Here, we present a robust and validated method based on reversed-phase ultrahigh-performance supercritical fluid chromatography-tandem mass spectrometry (RP-UHPSFC/MS/MS) for the high-throughput profiling of less polar lipids in human plasma. The sample preparation workflow involves an initial Folch-based extraction, followed by chemical derivatization with benzoyl chloride, and the final liquid–liquid extraction into hexane to isolate less polar acylated analytes. This strategy enables the sensitive profiling of six major lipid classes (TG, DG, MG, SE, ST, and FA) in positive ion mode in less than 18 min. The use of two C18 columns in series provides high chromatographic resolution, sufficient to separate isomeric species, including cis/trans and positional isomers of double bonds in fatty acids. The method was rigorously validated for five lipid classes, except free FA, and the implementation of response factors was shown to be essential for the accurate quantification of sterol esters. A total of 147 lipid species were quantified in NIST SRM 1950 human plasma, demonstrating its suitability for large-scale lipidomic studies focused on less polar lipids. Quantitative Profiling; Less Polar Lipids; Human Plasma; Reversed-Phase; UHPSFC/MS/MS

Departments

Other Parts

Map

en.mapy.cz

Services

Popular Links

© 2023 University of Pardubice, Studentská 95, 532 10 Pardubice 2
Phone: +420 466 036 111, 466 036 112, 466 036 113
Webmaster, RSS
Data box ID: f5vj9hu
Accessibility Statement
CC BY-NC-ND 4.0Creative CommonsAttributionNonCommercialNoDerivatives