Publication detail

A highly sensitive headspace gas chromatographic method fully optimized for fast routine determination of carboxyhemoglobin in postmortem blood

Year: 2025

Type of publication: článek v odborném periodiku

Name of source: Journal of Analytical Toxicology

Publisher name: Oxford University Press

Place: Oxford

Page from-to: nestránkováno

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
cze	Vysoce citlivá metoda plynové chromatografie v headspace uspořádání optimalizovaná pro rychlé rutinní stanovení karboxyhemoglobinu v posmrtné krvi	V některých případech může být stanovení koncentrace karboxyhemoglobinu (COHb) v posmrtné krvi pomocí standardních spektrofotometrických metod buď nemožné, nebo může vést k zavádějícím výsledkům. Ve forenzních laboratořích roste potřeba analyzovat saturaci COHb ve vzorcích pitevní krve, jejichž kvalita je často ohrožena různými faktory. Proto byla vyvinuta a validována metoda plynové chromatografie, která potvrzuje výsledky zavedené spektrofotometrické metody a stanovuje koncentraci COHb v posmrtných vzorcích ovlivněných procesy, jako je hniloba nebo termokoagulace. Tato metoda je založena na automatizované analýze vzorku krve ošetřeného roztokem hexakyanoželezitanu draselného a saponinu v headspace prostoru. Využívá kombinaci dvou kapilárních kolon pro chromatografickou separaci, následovanou vysoce citlivým detekčním systémem, který zahrnuje metanizátor pro přeměnu oxidu uhelnatého (CO) na metan v plamenoionizačním detektoru. Procento koncentrace COHb se vypočítá pomocí poměru analyzované krve ke krvi plně nasycené CO. Pečlivá optimalizace metody snížila potřebu vzorku na 100 mg při zachování vysoké citlivosti. Proces předúpravy vzorku byl navíc zjednodušen, aby bylo možné metodu snadno integrovat do rutinního provozu konvenční forenzní laboratoře. Metoda vykazuje linearitu v koncentračním rozsahu 0,1 % až 100 % COHb. Stanovené hodnoty meze detekce (<0,01 % COHb) a meze kvantifikace (0,1 % COHb) odrážejí vynikající citlivost. Celkově validační studie potvrdila, že metoda splňuje zamýšlený účel. Metoda je obzvláště účinná při spolehlivém stanovení obsahu COHb v hnilobných a podobně degradovaných vzorcích. Její robustnost byla dále ověřena analýzou desítek reálných vzorků po dobu více než 4 let.	Uxid uhelnatý; Validace; Posmrtná krev
eng	A highly sensitive headspace gas chromatographic method fully optimized for fast routine determination of carboxyhemoglobin in postmortem blood	In some cases, the determination of carboxyhemoglobin (COHb) concentration in postmortem blood using standard spectrophotometric methods, may be either impossible or yield misleading results. In forensic laboratories, there is an increasing need to analyze COHb saturation in autopsy blood samples, the quality of which is often compromised by various factors. Therefore, a gas chromatographic method has been developed and validated to confirm the results of an established spectrophotometric method and to determine the concentration of COHb in postmortem samples affected by processes such as putrefaction or thermocoagulation. This method is based on automated headspace analysis of a blood sample treated with a solution of potassium hexacyanoferrate and saponin. It employs a combination of two capillary columns for chromatographic separation, followed by a highly sensitive detection system that incorporates a methanizer to convert carbon monoxide (CO) to methane couple to a flame ionization detector. The percentage of COHb concentration is calculated using the ratio of the analyzed blood to that of fully CO-saturated blood. Careful optimization of the method has reduced the sample requirement to 100 mg while maintaining high sensitivity. Additionally, the sample pretreatment process has been simplified to ensure that the method can be easily integrated into the routine operation of a conventional forensic laboratory. The method demonstrates linearity across a concentration range of 0.1% to 100% COHb. The determined values of limit of detection (<0.01% COHb) and limit of quantification (0.1% COHb) reflect excellent sensitivity. Overall, the validation study confirmed the method for its intended purpose. The method is particularly effective in reliably determining COHb content in putrefied and similarly degraded samples. Its robustness has been further validated through the analysis of dozens of real samples over more than 4 years.	Carbon-monoxide; Validation; Postmortem Blood

Search

Login for students

Login for employees

Publication detail

Departments

Other Parts

Map

Services

Popular Links