University of PardubiceFaculty of Chemical Technology

University

Employees
|
Students
Česky

Publication detail

Stanovenie anticholinesterasovej aktivity pomocou elektrochemických senzorov

Authors: Vorčáková Katarína | Štěpánková Šárka | Imramovský Aleš | Vytřas Karel

Year: 2013

Type of publication: ostatní - přednáška nebo poster

Page from-to: nestránkováno

Titles:

Language	Name	Abstract	Keywords
slo	Stanovenie anticholinesterasovej aktivity pomocou elektrochemických senzorov	V súčasnosti sa v literatúre popisujú rôzne oblasti využitia elektrochemických senzorov. Jednou z možností môže byť použitie na prípravu biosenzorov, ktoré môžu byť následne použité na stanovenie biologických parametrov. Pri našej práci sme pracovali s komerčne tlačenými elektródami (trojelektródový systém: Pt /PdAg/Pt), ktoré sme použili na testovanie inhibičnej účinnosti vybraných inhibítorov acetylcholinesterasy (ACHE). Anticholinesterasovu aktivitu, charakterizovanú hodnotou IC50 (koncentrácia inhibítoru, ktorá spôsobí pokles maximálnej reakčnej rýchlosti na polovicu) sme merali dvoma spôsobmi. Prvý, kedy bol enzým ACHE prítomný v roztoku, druhý, kedy bol enzým ACHE imobilizovaný na povrch senzoru (vytvorenie biosenzoru). Ako imobilizačné techniky boli použité adsorpcia a zosieťovanie pomocou glutaraldehydu. Ako detekčná metóda bola použitá square-wave voltametria, ktorá je založená na oxidácii vznikajúceho produktu prostredníctvom vkladaného napätia. Výhodou oboch metód je použitie nízkeho reakčného objemu (v našom prípade 550 ?l). Prvá časť meraní už bola publikovaná. Testované inhibítory boli zo skupiny substituovaných phenyl karbamátov. Všetky reakcie prebiehali v prostredí fosfátového pufru PBS (pH 7,4) a ako substrát bol použitý acetylthiocholin vo výslednej koncentrácií 1 mM. Zo získaných hodnôt IC50 sme vyhodnotili účinnosť testovaných inhibítorov a porovnali sme použité metódy. Sériou meraní bolo zistené, že adsorpcia, ako imobilizačná technika, vykazovala lepšie vlastnosti. Pri použití biosenzorov, pripravených pomocou zosieťovania glutaraldehydu, dochádzalo ku sorpcií inhibítoru na senzor. Sériou meraní boli získané hodnoty inhibičnej účinnosti a bolo zistené, že vypočítané hodnoty IC50 majú približne rovnaké hodnoty. Na základe získaných výsledkov usudzujeme, že biosenzory pripravené fyzikálnou adsorpciou môžu byť použité na stanovenie anticholinesterasovej aktivity.	anticholinesterasova aktivita; elektrochemické senzory