Login for students

Login for employees

Publication detail

Dot-ELISA Affinity Test: An Easy, Low-Cost Method to Estimate Binding Activity of Monoclonal Antibodies
Authors: Svobodová Zuzana | Jankovičová Barbora | Horák Daniel | Bílková Zuzana
Year: 2013
Type of publication: článek v odborném periodiku
Name of source: Journal of Analytical and Bioanalytical Techniques
Publisher name: OMICS Group
Place: Constanta
Page from-to: 1-5
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Dot-ELISA afinitní test: jednoduchá, levná metoda k určení vazebné aktivity monoklonálních protilátek Výběr správné monoklonální protilátky (mAb) pro imunoafinitní aplikace může být obtížný, protože mnoho výrobců mAb nabízí širokou škálu mAb klonů proti cílovým molekulárním strukturám. Jelikož existují značné rozdíly v kvalitě mAb klonů, a to zejména v jejich vazebné aktivitě, byla vyvinuta snadná metoda pro rychlé a levné srovnání různých mAb klonů. Dot-ELISA afinitní test je jednoduchá, univerzální a instrumentálně nenáročná technika, protože nevyžaduje žádné drahé vybavení (jako je například ELISA reader nebo chemiluminiscenční/fluorescenční zobrazovací systém), a může tak být proveden v jakékoliv biochemické laboratoři. Tato metoda je založena na již dříve popsané dot-ELISA technice, která je kombinována s chaotropním krokem za použití různých koncentrací thiokyanátu amonného v rozmezí 0-2 M. V této práci byl afinitní dot-ELISA test optimalizován s použitím Abeta peptidu jako antigenu a anti-Abeta mAb. Vyvinutý protokol byl poté aplikován na panel osmi anti- EpCAM (epiteliální molekuly buněčné adheze) mAb, které by měly být následně použity pro přípravu magnetických imunosorbentů pro záchyt cirkulujících nádorových buněk (CTCs) . Dot blot; Dot-ELISA; afinita; monoklonální protilátka; chaotropní eluce; EpCAM; Abeta peptidy
eng Dot-ELISA Affinity Test: An Easy, Low-Cost Method to Estimate Binding Activity of Monoclonal Antibodies Selecting the right monoclonal antibody (mAb) for an immunoaffinity-based application can be tricky, as many mAb producers offer a wide range of mAb clones against molecular structures of interest. Since there are significant differences in the quality of mAb clones, and particularly in their binding activity, an easy method for quick and low-cost comparison of various mAb clones was developed. The dot-ELISA affinity test is a simple, versatile and instrumentally no demanding technique, since it requires no expensive equipment (such as an ELISA reader or chemiluminescence/fluorescence imaging system) and can be performed in any biochemical laboratory. This method is based on a previously described dot-ELISA technique that is improved with a chaotropic step using different concentrations of ammonium thiocyanate in the range 0-2 M. In this work, the dot-ELISA affinity test was optimized on Abeta peptide as antigen and anti-Abeta mAb. Such protocol was then applied to a panel of eight anti-EpCAM (epithelial cell adhesion molecule) mAbs which should be subsequently used for preparation of magnetic immunosorbent to capture circulating tumor cells (CTCs). Dot blot; Dot-ELISA; Affinity; Monoclonal antibody; Chaotropic elution; EpCAM; Abeta peptides

Departments

Other Parts

Map

en.mapy.cz

Services

Popular Links

© 2023 University of Pardubice, Studentská 95, 532 10 Pardubice 2
Phone: +420 466 036 111, 466 036 112, 466 036 113
Webmaster, RSS
Data box ID: f5vj9hu
Accessibility Statement
CC BY-NC-ND 4.0Creative CommonsAttributionNonCommercialNoDerivatives