Login for students

Login for employees

Publication detail

Produkce a charakterizace predikovaných alkalických fosfatáz Pho15p z patogenních kvasinek Candida albicans a Candida parapsilosis
Authors: Kročová Eliška | Hrušková-Heidingsfeldová Olga | Kupčík Rudolf | Janovská Sylva | Bílková Zuzana
Year: 2014
Type of publication: ostatní - přednáška nebo poster
Page from-to: nestránkováno
Titles:
Language Name Abstract Keywords
cze Produkce a charakterizace predikovaných alkalických fosfatáz Pho15p z patogenních kvasinek Candida albicans a Candida parapsilosis Záměrem projektu bylo vyrobit standardními molekulárně genetickými technikami rekombinantní proteiny, predikované alkalické fosfatázy, pocházející z kvasinek Candida albicans a Candida parapsilosis. Pomocí afinitní kapalinové chromatografie dané rekombinantní proteiny izolovat a pomocí adekvátních analytických metod získané produkty analyzovat a charakterizovat. Genomy patogenních kvasinek C. albicans a C. parapsilosis byly sekvenovány, anotovány a jsou veřejně přístupné (http://candidagenome.org/). U většiny otevřených čtecích rámců (ORF) však dosud nebylo ověřeno, že skutečně kódují předpokládané proteiny. To platí zejména pro méně zkoumanou C. parapsilosis. Otevřené čtecí rámce orf19.4444 a CPAR2_206650 v těchto kvasinkách pravděpodobně kódují alkalickou fosfatázu Pho15p. Tento předpoklad byl však učiněn jen na základě homologie s genem PHO13 kvasinky Saccharomyces cerevisiae. Proto jsme si dali za cíl ověřit, že je tomu skutečně tak. Na základě podrobné molekulárně biologické analýzy jsme navrhli a pomocí metod genetického inženýrství jsme připravili expresní vektory obsahující ORF pro Pho15p C. albicans a C. parapsilosis, a to tak, že jsme předpokládané kódující sekvence vložili do vektoru pET28b. Zrušili jsme stop kodóny a na 3´konec jsme vložili sekvenci pro histidinovou kotvu (His-tag, sekvence 6 histidinů). Takto vznikly expresní vektory pro fúzní proteiny Pho15p-His-tag. Vnesením expresních vektorů do kmene Escherichia coli BL21(DE3) jsme připravili produkční kmeny E. coli schopné produkovat tyto fúzní proteiny. rekombinantní proteiny, alkalická fosfatáza, Pho15p, Candida albicans, Candida parapsilosis

Departments

Other Parts

Map

en.mapy.cz

Services

Popular Links

© 2023 University of Pardubice, Studentská 95, 532 10 Pardubice 2
Phone: +420 466 036 111, 466 036 112, 466 036 113
Webmaster, RSS
Data box ID: f5vj9hu
Accessibility Statement
CC BY-NC-ND 4.0Creative CommonsAttributionNonCommercialNoDerivatives