Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Continuous comprehensive two-dimensional liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry of complex lipidomic samples
Autoři: Holčapek Michal | Ovčačíková Magdaléna | Lísa Miroslav | Cífková Eva | Hájek Tomáš
Rok: 2015
Druh publikace: článek v odborném periodiku
Název zdroje: Analytical and Bioanalytical Chemistry
Název nakladatele: Springer
Místo vydání: Heidelberg
Strana od-do: 5033-5043
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Kontinuální komprehensivní dvoudimenzionální kapalinová chromatografie spojená s hmotnostní spektrometrií využívající elektrosprejovou ionizaci pro komplexní charakterizaci složitých lipidomických směsí Nová komprehensivní dvoudimenzionální kapalinová chromatografie spojená s hmotnostní spektrometrií využívající elektrosprejovou ionizaci byla vyvinuta pro komplexní charakterizaci složitých lipidomických směsí. V první dimenzi byla použita kapalinová chromatografie v reversních fázích se stacionární fází C18 (150 mm×1 mm, 1.7 μm). Lipidy překrývající se v první dimenzi, mohou být rozděleny pomocí druhé dimenze využívající kapalinové chromatografie hydrofilních interakcí ((50 mm×3 mm, 2.7 μm, povrchově porézní částice). Retenční časy v obou dimenzích, přesnost určení hmoty a tandemová hmotnostní spektrometrie poskytují vysokou přesnost určení jednotlivých lipidů. Retenční chování lipidů v RP-LC je založeno na počtu ekvivalentních uhlíků (ECN), jsou lipidy eluovány podle délky uhlíkového řetězce a počtu dvojných vazeb, Zatímco v HILIC jsou jednotlivé lipidy eluovány na základě rozdílných polarit. Tato analytická metoda byla aplikována pro lipidomickou charakterizaci celkového lipidového extraktu lidské krevní plasmy a mozku prasete. Celkem bylo identifikováno 143 druhů lipidů ze čtyř kategorií a deseti lipidových tříd.
eng Continuous comprehensive two-dimensional liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry of complex lipidomic samples A new continuous comprehensive two-dimensional liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry method has been developed for the lipidomic characterization of complex biological samples. The reversed-phase ultra-high-performance liquid chromatography with a C-18 column (150 mm x 1 mm, 1.7 mu m) used in the first dimension makes the separation of numerous lipid species differing in their hydrophobic part of the molecule, mainly fatty acyl chain lengths and the number and positions of double bonds, possible. Coeluted lipid species in the first dimension are resolved by the fast hydrophilic interaction liquid chromatography separation (50 mm x 3 mm, 2.7 mu m, core-shell particles) of lipid classes according to their different polarities in the second dimension. Retention times in both dimensions, accurate m/z values, and tandem mass spectra provide high confidence in the identification of lipid species. The retention behavior of individual lipids in reversed-phase mode follows the equivalent carbon number pattern, which provides an additional tool for unambiguous identification. This analytical method is applied for the lipidomic characterization of total lipid extracts of human plasma and porcine brain samples, which resulted in the identification of 143 lipid species from four lipid categories and ten lipid classes. Lipids; Lipidomics; Comprehensive 2D liquid chromatography; Mass spectrometry; Plasma; Brain