Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

High-Throughput and Comprehensive Lipidomic Analysis Using Ultrahigh-Performance Supercritical Fluid Chromatography-Mass Spectrometry
Autoři: Lísa Miroslav | Holčapek Michal
Rok: 2015
Druh publikace: článek v odborném periodiku
Název zdroje: Analytical Chemistry
Název nakladatele: American Chemical Society
Místo vydání: Washington
Strana od-do: 7187-7195
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Analýzu lipidů pomocí ultra-vysokoúčinné superkritické fluidní chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií V této práci je uvedena nová analytická metoda pro lipidomickou analýzu komplexních biologických vzorků pomocí ultra-vysokoúčinné superkritické fluidní chromatografie (UHPSFC) ve spojení s hmotnostní spektrometrií využívající elektrosprejovou ionizaci (ESI-MS). Jsou zde pečlivě optimalizované všechny parametry UHPSFC a je zde diskutován jejich vliv na separace lipidů. Metoda UHPSFC/ESI-MS umožňuje rychlé oddělení 30 nepolárních a polárních tříd lipidů během 6 minut. Jednotlivé druhy lipidů v rámci skupiny jsou identifikovány na základě pozitivního a negativního módu a pomocí tandemové hmotnostní spektrometrie měřené s vysokou přesností a vysokou rozlišovací schopností. Vyvinutá metoda byla použita pro analýzu extraktu mozku z prasete, kde bylo identifikováno 24 tříd lipidů obsahující 436 jednotlivých druhů lipidů.
eng High-Throughput and Comprehensive Lipidomic Analysis Using Ultrahigh-Performance Supercritical Fluid Chromatography-Mass Spectrometry New analytical approach for high-throughput and comprehensive lipidomic analysis of biological samples using ultrahigh-performance supercritical fluid chromatography (UHPSFC) with electrospray ionization-mass spectrometry (ESI-MS) is presented in this work as an alternative approach to established shotgun MS or high-performance liquid chromatography-MS. The lipid class separation is performed by UHPSFC method based on 1.7 mu m particle-bridged ethylene hybrid silica column with a gradient of methanol-water-ammonium acetate mixture as a modifier. All parameters of UHPSFC conditions are carefully optimized and their influence on the chromatographic behavior of lipids is discussed. The final UHPSFC/ESI-MS method enables a fast separation of 30 nonpolar and polar lipid classes within 6 min analysis covering 6 main lipid categories including fatty acyls, glycerolipids, glycerophospholipids, sphingolipids, sterols, and prenols. Individual lipid species within lipid classes are identified based on positive and negative-ion full-scan and tandem mass spectra measured with high mass accuracy and high resolving power. Developed UHPSFC/ESI-MS method is applied for the analysis of porcine brain extract as a complex lipidomic sample, where 24 lipid classes containing 436 lipid species are identified. The method is validated for the quantitative analysis of lipid species in biological tissues using internal standards for each lipid class. This high-throughput, comprehensive and accurate UHPSFC/ESI-MS method is suitable for the lipidomic analysis of large sample sets in the clinical research. interaction liquid-chromatography; pressure chemical-ionization; shotgun lipidomics; human plasma; lipoprotein fractions; fatty-acid; silver-ion; identification; separation; oils