Univerzita Pardubice Fakulta chemicko- technologická

Univerzita Pardubice

Zaměstnanci
|
Studenti
English

Publikace detail

Analýza lipidů pomocí SFC/MS

Autoři: Lísa Miroslav | Holčapek Michal

Rok: 2015

Druh publikace: ostatní - přednáška nebo poster

Strana od-do: nestránkováno

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Analýza lipidů pomocí SFC/MS	Přírodní vzorky lipidů představují velice komplexní směsi s velkou strukturní odlišností jednotlivých látek, což klade vysoké nároky na analytické techniky používané pro jejich charakterizaci. V současné době jsou pro lipidomickou analýzu používány především dva základní přístupy. Shotgun analýza využívá analýzy vzorku pomocí hmotnostní spektrometrie a speciálních skenů bez předchozí separace lipidů. Výhodou je relativně rychlá analýza vzorku, avšak může docházet k potlačování ionizace látek navzájem díky přítomnosti všech látek najednou v iontovém zdroji a neumožňuje identifikaci většiny izomerů. Další přístup využívá separace a identifikace lipidů pomocí kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie (MS). Tento přístup poskytuje detailnější informace o složení lipidů včetně identifikace izomerů, ale často je potřeba kombinovat několik chromatografických metod kvůli složitosti vzorku, což je časově náročné. Cílem této práce bylo vyvinout rychlou analytickou metodu pro komplexní lipidomickou analýzu pomocí superkritické fluidní chromatografie (SFC) s MS identifikací. Byly optimalizovány parametry SFC separace s cílem rozlišit maximální množství tříd lipidů. Finální SFC/MS analýza umožňuje separaci 16 tříd polárních a nepolárních lipidů v rámci 6 min. Zároveň bylo dosaženo částečné separace jednotlivých lipidů v rámci tříd na základě různého počtu dvojných vazeb a délky acylů. Třídy lipidů a složení esterifikovaných acylů byly identifikovány na základě naměřených tandemových hmotnostních spekter pomocí ESI ionizace v pozitivním i negativním záznamu iontů. Pro separaci lipidů koeluujících v SFC byla využita iontová mobilita jako další separační dimenze, která umožňuje separaci lipidů podle délky acylu a počtu dvojných vazeb. Finální SFC/MS metoda byla použita pro charakterizaci složení lipidů v biologických tkáních.