Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Enzyme-Linked Electrochemical Detection of PCR-Amplified Nucleotide Sequences Using Disposable Screen-Printed Sensors. Applications in Gene Expression Monitoring
Autoři: Horáková Petra | Fojtová Miloslava | Vytřas Karel | Fojta Miroslav
Rok: 2008
Druh publikace: článek v odborném periodiku
Název zdroje: Sensors
Název nakladatele: Molecular Diversity Preservation International
Místo vydání: Basel
Strana od-do: 193-210
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Imunoelektrochemická detekce nukleotidových sekvencí po PCR s využitím jednorázových tištěných senzorů. Uplatnění při monitorování exprese genů Jsou představeny imunoelektrochemické techniky pro sledování specifických sekvencí DNA. Tyto techniky jsou založeny na navázání konjugátu streptavidin-alkalická fosfatáza na biotinové značky DNA, imobilizované na povrch jednorázových uhlíkových tištěných elektrod (SPCE) s následnou produkcí a electrochemickým stanovením elektroaktivního indikátoru 1-naftolu. Bylo dosaženo vysoce specifického rozlišení mezi komplementárními a nekomplementárními nukleotidovými sekvencemi hybridizací imobilizované DNA s biotinem značenými sondami. Hybridizační stanovení s využitím imunoenzymové reakce bylo úspěšně využito při analýze sekvencí genomické DNA po aplikaci PCR techniky a při sledování exprese genů v rostlinách. Dále byl představen další způsob specifické inkorporace biotinem značených nukleotidů do DNA pomocí techniky primer extension. Zavedení několika biotinových značek na sondu primeru významně zvýšilo intenzitu signálu a zlepšilo specifitu stanovení. elektrochemická detekce;stanovení s využitím enzymu;hybridizace DNA;prodloužení primeru;PCR;exprese genu
eng Enzyme-Linked Electrochemical Detection of PCR-Amplified Nucleotide Sequences Using Disposable Screen-Printed Sensors. Applications in Gene Expression Monitoring Electrochemical enzyme-linked techniques for sequence-specific DNA sensing are presented. These techniques are based on attachment of streptavidin-alkaline phosphatase conjugate to biotin tags tethered to DNA immobilized at the surface of disposable screen-printed carbon electrodes (SPCE), followed by production and electrochemical determination of an electroactive indicator, 1-naphthol. Via hybridization of SPCE surface-confined target DNAs with end-biotinylated probes, highly specific discrimination between complementary and non-complementary nucleotide sequences was achieved. The enzyme-linked DNA hybridization assay has been successfully applied in analysis of PCR-amplified real genomic DNA sequences, as well as in monitoring of plant tissue-specific gene expression. In addition, we present an alternative approach involving sequence-specific incorporation of biotin-labeled nucleotides into DNA by primer extension. Introduction of multiple biotin tags per probe primer resulted in considerable enhancement of the signal intensity and improvement of the specificity of detection. electrochemical detection;enzyme-linked assay;DNA hybridization;primer extension; PCR;gene expression

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte

© 2023 Univerzita Pardubice, Studentská 95, 532 10 Pardubice 2
Telefon: 466 036 111
Správce webu, RSS
ID datové schránky: f5vj9hu
Prohlášení o přístupnosti
Drupal web od drupal web Drupal ᐬrts