Publikace detail

Determination of branched chain amino acids, methionine, phenylalanine, tyrosine and alpha-keto acids in plasma and dried blood samples using HPLC with fluorescence detection

Autoři: Kanďár Roman | Žáková Pavla | Jirošová Jana | Sladká Michaela

Rok: 2009

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Clinical Chemistry and Laboratory Medicine

Název nakladatele: Walter de Gruyter GmbH & Co. KG

Místo vydání: Berlin

Strana od-do: 565-572

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Stanovení aminokyselin s rozvětveným řetězcem, methioninu, fenylalaninu, tyrosinu a alfa-ketokyselin v plazmě a vzorcích suché krve pomocí HPLC s fluorescenční detekcí	Vzorky venózní krve, obsahující EDTA jako antikoagulační činidlo, byly získány od dobrovolných dárců krve. Vzorky krve novorozenců byly odebírány na filtrační papír a sušeny nejméně 24 h před analýzou. Před vlastní separací byly aminokyseliny (AA) derivatizovány s o-ftaldialdehydem (OPA) a BCKA s o-fenylendiaminem (OPD). Pro separaci byla vybrána kolona s vázanou reverzní fází a efluent byl monitorován pomocí fluorescenčního detektoru. Pro analýzu AA byla použita gradientová eluce s mobilní fází A: 25 mmol/l hydrogenfosforečnan sodný-methanol (90:10, v/v), pH 6,5 +/- 0,1 a mobilní fází B (100% methanol); pro analýzu BCKA byla použita rovněž gradientová eluce, mobilní fáze A byla směs methanolu a deionizované vody (55:45, v/v) a mobilní fáze B byl 100% methanol. Analytické parametry těchto metod jsou vyhovující. Přesnost v sérii a mezi sériemi byly pod 10% a výtěžnost se pohybovala v rozmezí 90%-110%.	aminokyseliny s rozvětveným řetězcem; suché krevní skvrny;HPLC s fluorescenční detekcí;ketokyseliny odvozené od aminokyselin s rozvětveným řetězcem
eng	Determination of branched chain amino acids, methionine, phenylalanine, tyrosine and alpha-keto acids in plasma and dried blood samples using HPLC with fluorescence detection	Samples of peripheral venous blood with EDTA as anticoagulant were obtained from a group of healthy blood donors. Blood-spot samples from a group of newborns were collected onto Specimen Collection Paper and allowed to dry for at least 24 h before analysis. Prior to separation, the amino acids (AA) were derivatized with o-phthaldialdehyde (OPA) and BCKA with o-phenylenediamine (OPD). Reverse phase column chromatography was used for separation and fluorescence detection used to monitoring of effluent. For AA analysis, 25 mmol/L sodium hydrogenphosphate-methanol (90:10, v/v), pH 6.5 +/- 0.1 was used as mobile phase A and 100% methanol was used as mobile phase B. Measurement of BCKA used a mixture of methanol and deionized water (55:45, v/v) as mobile phase A and mobile phase B consisted of 100% methanol. Analytical performance of these methods was satisfactory for the determination of all AA and BCKA. The intra- and inter-assay coefficients of variation were below 10% and recovery ranged from 90%-110%.	branched chain amino acids;dried blood spots;HPLC with fluorescence detection;alpha-keto acids derived from branched chain amino acids

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte