Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Detection of Single Nucleotide Polymorphisms in p53 Mutation Hotspots and Expression of Mutant p53 in Human Cell Lines Using an Enzyme-Linked Electrochemical Assay
Autoři: Horáková Petra | Šimková Eva | Vychodilová Zdenka | Brázdová Marie | Fojta Miroslav
Rok: 2009
Druh publikace: článek v odborném periodiku
Název zdroje: Electroanalysis
Název nakladatele: Wiley-VCH
Místo vydání: Weinheim
Strana od-do: 1723-1729
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze V publikaci je představena enzymová elektrochemická metoda pro detekci jednonukleotidových polymorfismů (SNP) v nádorovém supresorovém genu p53. Tato metoda je založena na prodloužení primeru katalyzovaném DNA polymerázou o jeden nukleotid nesoucí biotin, navázání konjugátu streptavidinu s alkalickou fosfatázou a následné elektrochemické detekci produktu enzymové reakce. Kromě modelových studií se syntetickými oligonukleotidy byla provedena detekce exprese mutantního p53 v lidských buněčných liniích.
eng Detection of Single Nucleotide Polymorphisms in p53 Mutation Hotspots and Expression of Mutant p53 in Human Cell Lines Using an Enzyme-Linked Electrochemical Assay An enzyme-linked electrochemical technique for single nucleotide polymorphism (SNP) typing in the p53 tumor suppressor gene is presented. The technique is based on a DNA polymerase-catalyzed extension of a primer hybridized to a target DNA strand upstream to the SNP site by one nucleotide bearing a biotin tag. Efficient incorporation of the biotinylated nucleotide occurs only in the case of complementarity between the first nucleotide in ss 5-overhang of the target strand. The biotin tag is detected after capture of the primer extension products at magnetic beads bearing oligoT strands via oligoA adaptors at 5-ends of the primer, binding of streptavidin-alkaline conjugate and enzymatic conversion of 1-naphthyl phosphate into 1-naphthol. In addition to model studies with synthetic oligonucleotides, we report on detection of mutant p53 expression in human cell lines using reverse transcription-PCR technique combined with amplified primer extension and the magnetic beads-based electrochemical assay. enzyme-linked electrochemical assay;SNP typing;p53;mutation;magnetic beads;polymorphism

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

zobrazit na mapy.cz

Služby

Často hledáte

© 2023 Univerzita Pardubice, Studentská 95, 532 10 Pardubice 2
Telefon: 466 036 111, 466 036 112, 466 036 113
Správce webu, RSS
ID datové schránky: f5vj9hu
Prohlášení o přístupnosti
CC BY-NC-ND 4.0 CZ