Publikace detail

Determination of phenylalanine and tyrosine in whole blood by HPLC with fluorescence detection

Rok: 2007

Druh publikace: článek ve sborníku

Název zdroje: Klinická biochemie a metabolismus

Název nakladatele: Česká lékařská společnost J. E. Purkyně

Místo vydání: Praha

Strana od-do: 70

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Stanovení fenylalaninu a tyrosinu v plné krvi pomocí HPLC s fluorescenční detekcí	Cíl. Vyvinout rychlou, jednoduchou a selektivní metodu pro diagnostiku fenylketonurie v rámci laboratorního cvičení. Metoda. Byla vyvinuta metoda pro simultánní stanovení fenylalaninu a tyrosinu v plné krvi. Využili jsme vlastní fluorescence fenylalaninu a tyrosinu. Jako stacionární fázi jsme použili chromatografickou kolonu LiChroCart 125-4 Purospher RP-18e, 5 um. Mobilní fází byla směs methanolu a deionizované vody (10:90, v/v). Výsledky. Analytické parametry metody jsou dostatečné jak pro fenylalanin, tak také tyrosin.. Variační koeficienty přesnosti v sérii byly 2,08% pro fenylalanin a 2,83% pro tyrosin. Výtěžnosti metody byly 96,95% (CV 1,24%) pro fenylalanin a 102,80% (CV 2,23%) pro tyrosin. Kalibrační křivka byla lineární v celém testovaném rozmezí. Předběžné referenční hodnoty u skupiny dobrovolných dárců krve byly 53,81 +/- 11,33 umol/l pro fenylalanin a 58,51 +/- 18,98 umol/l pro tyrosin. Závěry. Vyvinuli jsme rychlou, jednoduchou a velmi selektivní HPLC metodu s fluorescenční detekcí pro simultánní stanovení fenylalaninu a tyrosinu v plné krvi. Tato metoda poskytuje výbrnou citlivost, přesnost a správnost a je tak vhodná pro klinické testy. Poděkování. Tato práce byla podpořena grantem MSM FRVS/2007/1655.	fenylketonurie; fenylalanin; tyrosin; kapalinová chromatografie s fluorescenční detekcí
eng	Determination of phenylalanine and tyrosine in whole blood by HPLC with fluorescence detection	Objective. To develop a rapid, simple and selective method for the diagnosis of phenylketonuria within the laboratory training. Method. A HPLC method for the simultaneous measurement of phenylalanine and tyrosine in whole blood has been developed and evaluated. We used inherent fluorescence of both phenylalanine and tyrosine. For the separation, reverse phase column LiChroCart 125-4 Purospher RP-18e, 5 um, was used. The mixture of methanol and deionized water (10:90, v/v) was used as mobile phase. Results. The analytical performance of this method is satisfactory for both phenylalanine and tyrosine. The intra-assay coefficients of variation were 2.08% and 2.83%, respectively. The recoveries were 96.95% (CV 1.24%) and 102.80% (CV 2.23%), respectively. The calibration curve was linear in the whole range tested. The preliminary reference ranges of phenylalanine and tyrosine in a group of blood donors are 53.81 +/- 11.33 umol/L and 58.51 +/- 18.98 umol/L. Conclusion. We developed a rapid, simple and very selective HPLC method with fluorescence detection for the determination of both phenylalanine and tyrosine in whole blood. This method provides excellent sensitivity, precision, and accuracy in follow-up samples and is suitable for clinical testing purposes. Acknowledgments. This work was supported by grant MSM FRVS/2007/1655.	phenylketonuria; phenylalanine; tyrosine; liquid chromatography with fluorescence detection

Search

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte