Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Stanovení glutathionu v primární kultuře hepatocytů.
Autoři: Roušar Tomáš | Červinková Zuzana | Mužáková Vladimíra | Kučera Otto | Lotková Halka | Kanďár Roman | Křiváková Pavla
Rok: 2005
Druh publikace: článek ve sborníku
Název zdroje: Česká a slovenská gastroenterologie a hepatologie
Název nakladatele: Česká lékařská společnost J. E. Purkyně
Místo vydání: Praha
Strana od-do: 272
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Stanovení glutathionu v primární kultuře hepatocytů. Úvod: Modelové poškození hepatocytů způsobené nejrůznějšími toxickými látkami (galaktosamin, thioacetamid) je často spojeno se zvýšeným oxidačním stresem. K posouzení jeho míry lze využít širokou škálu metod; jednou z nich je i analýza hladin glutathionu, významného buněčného antioxidantu. K určení hladin tohoto tripeptidu lze využívat mnoho odlišných metod, které musí vyhovovat kladeným nárokům ? stanovení redukované (GSH) i oxidované formy glutathionu (GSSG), vysoká citlivost a zábrana interference s ostatními látkami. Cílem naší práce bylo srovnání HPLC metody, která je v praxi nejužívanější, s metodou spektrofluorimetrickou, jejíž výhodou jsou nižší náklady a menší časová náročnost. Postup: Izolované potkaní hepatocyty (samci kmene Wistar) kultivované na kolagenem potažených Petriho miskách (Williamsovo médium E; 24 hod) byly lyzovány a deproteinovány. Následné stanovení glutathionu je založeno na reakci mezi GSH a o-ftaldialdehydem, po které vzniká silně fluoreskující produkt detekovaný při 350 nm a 420 nm. Závěr: Naše výsledky oproti obecně uváděným předpokladům zmiňovaným v mnoha publikacích dokládají, že spektrofluorimetrická metoda pro stanovení glutathionu je i v biologickém materiálu se složitou matricí zcela srovnatelná s jinými metodami a v některých parametrech je dokonce i převyšuje (náklady, časová náročnost). glutathion; hepatotoxiny; fluorimetrie
eng Glutathione assay in cultured hepatocytes Glutathione assay in cultured hepatocytes glutathione; fluorimetric assay; hepatocytes