Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Use of self assembled magnetic beads for on-chip protein digestion
Autoři: Slováková Marcela | Minc Nicolas | Bílková Zuzana | Smadja Claire | Faigle Wolfgang | Futterer Claus | Taverna Myriam | Viovy Jean-Louis
Rok: 2005
Druh publikace: článek v odborném periodiku
Název zdroje: Lab On a Chip
Název nakladatele: Royal Society of Chemistry
Místo vydání: Cambridge
Strana od-do: 935-942
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Použití organizovaných magnetických mikročástic pro proteolýzu v mikročipu Mikrofluidní zařízení vyrobené z PDMS vytváří silný magnetický gradient v paralelním směru s mikrokanálem. Magnetický trypsinový reaktor byl pevně fixován uvnitř mikrokanálu a byl použit pro proteolytické štěpení proteinů. Kinetická studie hydrolýzy modelových proteinů ukázala mnohonásobně účinnější proteolytickou reakci ve srovnání s vsádkovým uspořádáním. Systém mikročipu nabízí výhodu snadné výměny magnetického enzymového reaktoru. Mikročip byl použit pro proteolýzu modelového rekombinantního proteinu Somatotropin, výsledné MS analýzy prokázaly vysokou účinnost. trypsinový reaktor; IMER; mikročip; Michaelisova konstanta; limitovaná proteolýza
eng Use of self assembled magnetic beads for on-chip protein digestion The use of grafted trypsin magnetic beads in a microchip for performing protein digestion is described. The PDMS device uses strong magnets to create a magnetic field parallel to the flow with a strong gradient pointing through the centre of the chip channel. This allows for the formation of a low-hydrodynamic resistance plug of magnetic trypsin beads that serves as a matrix for protein digestion. This device represents an inexpensive way of fabricating a multi open-tubular-like column with an appropriate pore size for proteins. Kinetics studies of the hydrolysis of a model peptide show a 100-fold increase in digestion speed obtained by the microsystem when compared to a batch wise system. This system also offers the great advantage of easy replacement, as the bead matrix is easily washed out and replaced. High performance and reproducibility for digesting Somatotropin (recombinant human about 35%) are obtained from MS analysis of products after 10 minutes on-chip and 4h with soluble trypsin in bulk trypsin reactor; IMER; microchip device; Michaelis constant; limited proteolysis