Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

TECHNIKY EPITOPOVÉHO MAPOVÁNÍ PRO VYHLEDÁVÁNÍ ALERGENNÍCH EPITOPŮ POTRAVINOVÝCH ALERGENŮ
Autoři: Ouzká Šárka | Křenková Jana | Štěpánová Lucie | Bílková Zuzana | Královský Josef
Rok: 2005
Druh publikace: ostatní - přednáška nebo poster
Název zdroje: Chemické listy
Název nakladatele: Česká společnost chemická
Místo vydání: Praha
Strana od-do:
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze TECHNIKY EPITOPOVÉHO MAPOVÁNÍ PRO VYHLEDÁVÁNÍ ALERGENNÍCH EPITOPŮ POTRAVINOVÝCH ALERGENŮ Alergie se dnes stává skutečně závažným medicínským problémem s rostoucím trendem, v současné době postihuje 15 ? 25 % populace [1]. Konvenční specifická imunoterapie (SIT, hyposenzibilizace) pro léčbu alergií využívá opakovaného podávání zvyšujícího se množství směsi extraktů alergenů s cílem navodit toleranci na dané alergeny [2,3]. SIT s použitím nativních alergenů, schopných interakce se specifickými IgE protilátkami, je spojena s relativně vysokým výskytem negativních reakcí silně zatěžujících pacienta. Středem zájmu se proto dnes stává vývoj tzv. bezpečných vakcín pro léčbu alergií - s použitím krátkých lineárních peptidů. V tomto případě je nezbytné znát všechny imunogenní epitopy daného alergenu, identifikovat a izolovat z nich nejvýznamnější pro daného pacienta a tyto epitopy následně využít k SIT. K tomuto účelu slouží techniky epitopového mapování. Naším hlavním cílem je zavést metodu pro rychlé vyhledávání a izolaci alergenních epitopů potravinových alergenů s použitím nově vyvinutých enzymových a imunoafinitních reaktorů (IMERs a IMARs) v kombinaci s technikami epitopového mapování ?Epitope extraction" a "Epitope excision" spolu s MS detekcí eluovaných imunogenních epitopů . Technika epitopového mapování "Epitope excision" pro alergeny (obr. 1A) spočívá v limitované enzymatické proteolýze daného alergenu v komplexu se svou specifickou IgE protilátkou, vázanou na pevné fázi (tj. na magnetickém nosiči) a odolnou k proteolýze. Navázané zůstávají pouze fragmenty chráněné vazebným místem protilátky (tzv. alergenní epitopy). Při technice "Epitope extraction" (obr. 1B) se po proteolýze vybraného alergenu v roztoku za použití IMERs specificky vychytají IgE protilátkou, vázanou na pevné fázi, alergenní epitopy. Po důkladném promytí nenavázaných fragmentů je alergenní epitop eluován pomocí 0,1% TFA a analyzován pomocí ESI, MALDI-TOF nebo FT-ICR-MS. Pomocí modelového -amyloidního polypeptidu A(1-40), který je jedním z peptidů dávaných do souv potravinové alergeny; enzymové a imunoafinitní mikroreaktory; techniky epitopového mapování
eng EPITOPE MAPPING TECHNIQUES FOR SELECTING OF IMMUNOGENIC EPITOPES OF FOOD ALLERGENS URČENO PRO SEZNAM PUBLIKACÍ food allergen; enzyme and immunoaffinity microreactors; epitope mapping techniques