Publikace detail

Determination of ascorbic acid in human plasma by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection with a view to stability

Autoři: Kanďár Roman | Žáková Pavla | Richter Michal

Rok: 2005

Druh publikace: článek ve sborníku

Název zdroje: Clinica Chimica Acta

Název nakladatele: Elsevier Science BV

Místo vydání: Amsterdam

Strana od-do: 220

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Stanovení kyseliny askorbové v lidské plazmě pomocí vysoceúčinné kapalinové chromatografie s UV detekcí s ohledem na její stabilitu	V této práci je popsána metoda pro stanovení kyseliny askorbové (AA) pomocí vysoceúčinné kapalinové chromatografie s UV detekcí a možnosti precipitace proteinů s ohledem na stabilitu a výtěžnost. Cílem této práce bylo nalézt nejvhodnější precipitační činidlo pro stanovení AA ve smyslu stability a výtěžnosti. Testovali jsme různá precipitační činidla. K plazmě a roztoku AA (50 umol/l) jsme přidávali tato precipitační činidla: kyselinu metafosforečnou (5%), kyselinu chloristou (1,0 mol/l), kyselinu trichloroctovou (10%), kyselinu sulfosalicylovou (10%) acetonitril okyselený kyselinou chlorovodíkovou, acetonitril okyselený kyselinou octovou, methanol okyselený kyselinou chlorovodíkovou a ethanol okyselený kyselinou chlorovodíkovou. Pouze s dvěmi precipitačními činidly jsme dosáhli dostatečné výtěžnosti, a to s kyselinou metafosforečnou a kyselinou chloristou. Stabilita AA ve vzorcích byla sledována po dobu 10-ti hodin. Kyselina askorbová byla stabilní v chlazeném autosampleru (4 °C) nejméně 10 hodin (s poklesem 1,8% v roztoku AA a 2,8% v plazmě), byla-li použita kyselina metafosforečná jako precipitační činidlo. Naproti tomu byla stabilita AA při použití kyseliny chloristé horší (s poklesem 36,0% v roztoku AA a 7,3% v plazmě). Analytické parametry této metody byly vyhovující. Přesnost v sérii byla 2,1% a mezi sériemi 5,8%. Linearita byla dosažena v celém testovaném rozmezí (2,0 ? 250,0) umol/l. Výtěžnost byla 96,1% s variačním koeficientem 4,8% a detekční limit byl 25 pmol AA. Tato metoda je vysoce citlivá a s dobrou reprodukovatelností.	ascorbic acid; HPLC
eng	Determination of ascorbic acid in human plasma by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection with a view to stability	A method for the measurement of ascorbic acid (AA) using high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection and possibilities of protein precipitation with regard to stability and recovery are described. The aim of this work was to find out the most suitable precipitant reagent for the determination of AA in consideration of stability and recovery. The effectiveness of various protein precipitants was tested as follows. To plasma and AA solution (50.0 uM), the following different precipitant reagents were added: metaphosphoric acid (5%), perchloric acid (1.0 M), trichloroacetic acid (10%), sulfosalicylic acid (10%), acetonitrile with hydrochloric acid, acetonitrile with acetic acid, methanol with hydrochloric acid, and ethanol with hydrochloric acid. The only two protein precipitants that led to satisfactory recoveries of AA were metaphosphoric and perchloric acid. Stability of AA samples for analysis was investigated over 10 hours. Ascorbic acid samples extracted by metaphosphoric acid were stable at cooled autosampler (4 °C) for at least 10 h (with a decline 1.8% for AA solution and 2.8% for plasma). In consideration of stability of AA is perchloric acid as protein precipitant unsuitable (36.0% for AA solution and 7.3% for plasma). Analytical performance of this method is satisfactory. The intra- and inter-assay coefficient of variation was 2.1% and 5.8%, respectively. The calibration curve was linear in the whole range tested (2.0 ? 250.0) uM. The recovery was 96.1% (CV = 4.8%) and the limit of detection was 25 pmol. This assay is highly sensitive and reproducible HPLC method for the determination of ascorbic acid in human plasma.	malondialdehyd; HPLC

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte