Publikace detail

Determination of glutathione disulfide in human blood by an HPLC with fluorescence detection. Sample preparation is essential for accurate analysis.

Autoři: Kanďár Roman | Žáková Pavla | Štramová Xenie | Vrbová Martina | Čandová Jarmila

Rok: 2011

Druh publikace: ostatní - přednáška nebo poster

Název zdroje: Clinical Chemistry and Laboratory Medicine Special Supplement

Název nakladatele: Walter de Gruyter GmbH & Co. KG

Místo vydání: Berlin

Strana od-do: S840

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Stanovení glutathiondisulfidu v lidské krvi metodou HPLC s fluorescenční detekcí. Příprava vzorku je zásadní pro správnou anlýzu.	Oxidace glutathionu (GSH) na glutathiondisulfid (GSSG) je hlavním problémem při stanovení GSSG. Je zde popsána metoda pro správné měření hladin GSSG metodou HPLC s fluorescenční detekcí. Testovali jsme různá antikoagulační, deproteinační a thiol-maskovací činidla. Teplota, světlo, pH, rozpuštěný kyslík ve vzorku, rozpouštědlo, iontová síla mohou mít vliv na oxidaci GSH a stabilitu GSSG. Byla studována krátkodobá a dlouhodobá stabilita GSSG ve vzorcích. Nejlepší výsledky byly dosaženy za těchto podmínek: citrát (pH 5,9) jako antikoagulační činidlo, kyselina trichloroctová s EDTA jako deproteinační činidlo a pokud byl supernatant bezprostředně derivatizován s ortho-ftaldialdehydem za vzniku vysoce stabilního tricyklického isoindolového derivátu. Tricyklický isoindolový derivát je stabilní v chlazeném autosampleru (4 °C) nejméně po dobu 12 h. Analytické parametry této metody jsou vyhovující.	glutathiondisulfid; HPLC s fluorescenční detekcí; příprava vzorku; stabilita glutathiondisulfidu; oxidace glutathionu
eng	Determination of glutathione disulfide in human blood by an HPLC with fluorescence detection. Sample preparation is essential for accurate analysis.	Oxidation of glutathione (GSH) to glutathion disulfide (GSSG) is the major problem at measurement of GSSG. A method for the accurate measurement of GSSG by an HPLC with fluorescence detection is described. We have tested different anticoagulant agents, protein precipitants and thiol-masking agents. Temperature, light, pH, dissolved oxygen, solvent, ionic strength can influence an oxidation of GSH and a stability of GSSG too. Short-term and long-term stability of GSSG were studied. The best results were obtained under these conditions: a citrate (pH 5.9) as an anticoagulant agent, immediate addition of thiol-masking agent (N-ethylmaleimide), trichloroacetic acid with EDTA as a protein precipitant and supernatant was without delay subjected a derivatization procedure with ortho-phthaldialdehyde to form a highly stabile tricyclic isoindole derivative. Tricyclic isoindole derivative is stable on a cooled autosampler (4 °C) for at least 12 h. Analytical performance of this method is satisfactory.	glutathione disulfide; HPLC with fluorescence detection; sample preparation; glutathione disulfide stability; glutathione oxidation

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte