Publikace detail

Purified Acetaminophen-Glutathione Conjugate Is Able To Induce Oxidative Stress in Rat Liver Mitochondria

Rok: 2012

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Physiological Research

Název nakladatele: Fyziologický ústav AV ČR

Místo vydání: Praha

Strana od-do: S103-S109

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Purifikovaný konjugát acetaminofenu a glutathionu je schopný indukovat oxidační stres v potkaních jaterních mitochondriích	Předávkování acetaminofenem je jednou z nejčastějších příčin akutního jaterního selhání. Ačkoliv je toxický mechanismus delší dobu znám, přesto zůstává přesná příčina buněčné smrti neznámá. Cílem naší práce bylo přípravit, purifikovat a otestovat jeden z metabolitů acetaminofenu (APAP-SG), který je obecně považován za netoxický. K přípravě jsme využili organickou syntézu následovanou purifikací s využitím preparativní chromatografie. Konečná čistota činila >98 %. Toxický efekt připravené látky jsme testovali na izolovaných jaterních mitochondriích s využitím ROS-sondy. Naše výsledky ukázaly, že v přítomnosti konjugátu acetaminofenu a glutathionu a substrátů pro respirační komplex I i II vzrostla produkce ROS - o 104±13 % u 1 mM APAP-SG a o 130±10 % u 5 mM APAP-SG v přítomnosti glutamátu a malátu v porovnání s kontrolami. Produkce ROS závislá na přítomnosti substrátu pro komplex II byla zvýšena 4x během inkubace s 5 mM APAP-SG. Prokázali jsme, že APAP-SG je schopný indukovat produkci ROS v mitochondriích.	Toxicita acetaminofenu; glutathion; konjugát acetaminofenu a glutathionu
eng	Purified Acetaminophen-Glutathione Conjugate Is Able To Induce Oxidative Stress in Rat Liver Mitochondria	Acetaminophen overdose is the most often cause of acute liver injury. The toxic mechanism is linked to formation of an active metabolite that reacts with glutathione generating acetaminophen-glutathione conjugate (APAP-SG). This compound has been recognized to be non-toxic generally. Our preliminary results showed, however, that APAP-SG could possess a toxic effect too. Therefore, the aim of our study was to prepare, purify and to test possible toxicity of APAP-SG. We prepared APAP-SG using organic synthesis. The conjugate was purified by preparative HPLC and its structure was confirmed using mass spectrometry. Final purity of APAP-SG was >98 %. We estimated a toxic effect of APAP-SG in isolated rat liver mitochondria using a fluorescent ROS probe. We assessed ROS production in presence of complex I or complex II substrates. The increase of ROS-dependent fluorescence in presence of glutamate/malate was 104±13 % and 130±10 % in 1 mM and 5 mM APAP-SG, respectively, in comparison with controls. ROS production related to presence of complex II substrate was enhanced 4-times in APAP-SG (5 mM) treated mitochondria (compared to controls). We conclude, we proved our hypothesis that APAP-SG conjugate is able to induce a mitochondrial impairment leading to enhanced ROS production.	Acetaminophen toxicity; Glutathione; Acetaminophen-glutathione conjugate

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte