Publikace detail

Development of a magnetic immunosorbent for on-chip preconcentration of amyloid β isoforms: representatives of Alzheimer’s disease biomarkers

Rok: 2012

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Biomicrofluidics

Název nakladatele: American Institute of Physics

Místo vydání: Melville

Strana od-do: "024126-1"-"024126-12"

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Vývoj magnetického imunosorbentu pro prekoncentraci izoforem amyloidu beta, jako zástupce biomarkerů Alzheimerovy choroby, v mikročipovém zařízení	Stanovení biomarkerů Alzheimerovy choroby v mozkomišním moku (MMM) u pacientů s podezřením na tuto chorobu může pomoci odhalit onemocnění v jejím časném stádiu než dojde i k jejich klinickým projevům. Jedním z biomarkerů této choroby je amyloid beta, zejména jeho izoforma Abeta 1-42 (o délce 42 aminokyselin), jehož snížení koncentrace v MMM může znamenat rozvoj této chorby. V toto práci se autoři zabývají vývojem imunosorbentu na magnetických mikročásticích (1 μm) s imobilizovanou protilátkou anti-Abeta proti N-konci amyloidu beta, který je společný všem jeho izoformám (1-38, 1-39, 1-40, 1-42). Tento imunosorbent byl následně použit v mikrofluidním zařízení pro izolaci všech těchto izoforem ze 100 μl vzorku, tedy i MMM. Různé typy detekce byly použity, např. hmotnostní spektroskopie MALDI s TOF detekcí, kapilární elektroforéza a mikročipová elektroforéza a nakonec imumoblot.	Alzheimerova choroba; mikrofluidika; biomarker; amyloid beta; magnetické částice; imunosorbent
eng	Development of a magnetic immunosorbent for on-chip preconcentration of amyloid β isoforms: representatives of Alzheimer’s disease biomarkers	Determination of amyloid β (Aβ) isoforms – and in particular the proportion of the Aβ 1-42 isoform – in cerebrospinal fluid (CSF) of patients suspected of Alzheimer’s disease (AD) might help in early diagnosis and treatment of that illness. Due to the low concentration of Aβ peptides in biological fluids, a preconcentration step prior to the detection step is often necessary. This study utilized on-chip immunoprecipitation, known as micro-immunoprecipitation (μIP). The technique uses an immunosorbent (IS) consisting of magnetic beads coated with specific anti-Aβ antibodies organized into an affinity microcolumn by a magnetic field. Our goal was to thoroughly describe the critical steps in developing the IS, such as selecting the proper beads and anti-Aβ antibodies, as well as optimizing the immobilization technique and μIP protocol. The latter includes selecting optimal elution conditions. Furthermore, we demonstrate the efficiency of anti-Aβ IS for μIP and preconcentration of 5 Aβ peptides under optimized conditions using various subsequent analytical methods, including matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS), capillary electrophoresis (CE), microchip electrophoresis (MCE), and immunoblotting. Synthetic Aβ peptides samples prepared in buffer and spiked in human CSF were analyzed. Finally, on-chip immunoprecipitation of Aβ peptides in human CSF sample was performed.	immunosorbent; microfluidics; preconcentration; amyloid beta; Alzheimer’s disease; biomarker

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte