Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

STANOVENÍ MALONDIALDEHYDU V SEMINÁLNÍ PLAZMĚ METODOU KAPALINOVÉ CHROMATOGRAFIE
Autoři: Štramová Xenie | Svobodová Lenka | Hampl Radek | Kanďár Roman
Rok: 2012
Druh publikace: článek ve sborníku
Název zdroje: Monitorování cizorodých látek v životním prostředí XIV., sborník příspěvků ze semináře
Název nakladatele: Univerzita Pardubice
Místo vydání: Pardubice
Strana od-do: 167-174
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze STANOVENÍ MALONDIALDEHYDU V SEMINÁLNÍ PLAZMĚ METODOU KAPALINOVÉ CHROMATOGRAFIE Malondialdehyd (MDA) je konečným produktem radikály zprostředkované lipoperoxidace polynenasycených mastných kyselin (PUFA). Lipoperoxidace postihuje hlavně biologické membrány a lipoproteiny. Membránové fosfolipidy spermií obsahují především polynenasycené mastné kyseliny. MDA je toxická molekula reagující s lipidy, proteiny či DNA, čímž ovlivňuje fyziologické mechanismy v těle. Vzorky byly získány od pacientů Centra asistované reprodukce Sanus, Pardubice. MDA byl derivatizován kyselinou thiobarbiturovou a MDA(TBA)2 adukt byl stanoven vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií s fluorescenční detekcí. Mobilní fází byla směs 25 mmol/l KH2PO4 a ethanolu (80:20, v/v), pH 6,0. Analytické parametry metody byly uspokojivé. Přesnost v sérii vyjádřená variačním koeficientem byla 4,0 %, správnost vyjádřená průměrnou výtěžností byla 99,0 % (CV 3,6 %). Kalibrační křivka byla lineární v celém rozsahu koncentrací použitých standardů MDA (0,10 – 2,5 μmol/l). Hladina malondialdehydu se pohybovala v těchto rozmezích: všichni pacienti 0,82 - 2,22 µmol/l, kuřáci 0,91 - 2,22 µmol/l, nekuřáci 0,82 - 1,99 µmol/l. Prezentovaná HPLC metoda s fluorescenční detekcí je dostatečně citlivá, přesná a správná pro stanovení MDA v seminální plazmě. malondialdehyd; seminální plazma; HPLC
eng Determination of malondialdehyde in seminal plasma by high-performance liquid chromatography Malondialdehyde (MDA) is one of the final products of polyunsaturated fatty acids (PUFA) lipoperoxidation. Lipoperoxidation mainly affects biological membranes and lipoproteins. Sperm membrane phospholipids contain large number of polyunsaturated fatty acids. MDA is a toxic molecule reacting with lipids, proteins or DNA, and this way it affects physiological mechanisms in the organism. MDA is used as a diagnostic marker of lipoperoxidation and indicator of oxidative stress. Semen samples were obtained from consecutive male partners of couples presenting for a fertility evaluation at Sanus, Center of assisted reproduction, Pardubice. MDA was derivatized with thiobarbituric acid. MDA(TBA)2 aduct was determined by high performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detection. The mobile phase consisted of 20% ethanol in 25-mmol/L KH2PO4 (v/v), pH 6.00 ± 0.05. Analytical performance was satisfactory. Calibration curve was linear in the whole range tested: 0.10 – 2.5 μmol/L. MDA levels were in these ranges: all patients 0.82 – 2.22 µmol/L, smokers 0.91 – 2.22 µmol/L and non-smokers 0.82 – 1.99 µmol/L. Presented HPLC method with fluorescence detection is sensitive and accurate for seminal plasma MDA determination. malondialdehyde; seminal plasma; HPLC