Publikace detail

Optimization of Comprehensive Two-Dimensional Gradient Chromatography Coupling In-Line Hydrophilic Interaction and Reversed Phase Liquid Chromatography

Autoři: Jandera Pavel | Hájek Tomáš | Staňková Magda | Vyňuchalová Kateřina | Česla Petr

Rok: 2012

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Journal of Chromatography A

Název nakladatele: Elsevier Science BV

Místo vydání: Amsterdam

Strana od-do: 91-101

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Optimalizace gradientu v bezztrátové dvoudimenzionální chromatografii při on-line spojení HILIC a RP kapalinové chromatografie	On-line spojení HILIC×RP systémů by mělo poskytovat větší rozdíly v selektivitě a lepší ortogonalitu obou systémů než spojení RP×RP. Selektivita HILIC systémů závisí na selektivních polárních a nepolárních interakcí jednak s funkčními skupinami a také s matricí polárních kolon. Připravili jsme novou polární monolitickou sulfobetain-polymethakrylátovou kapilární kolonu s velkou účinností pro nízkomolekulární látky. Tuto kolonu jsme použili do první dimenze v HILIC×RP systému. V druhé dimenzi jsme použili kolony s povrchově porézními částicemi nebo monolitickou kolonu. Zkoumali jsme účinnost 11 krátkých 3 a 5 cm kolon pro rychlé gradienty (1,2 min) v druhé dimenzi HILIC×RP systému. Při přímém spojení bezztrátovho HILIC×RP systému se může vyskytovat rozšiřování nebo deformace píků díky velkým rozdílům v elučních silách mobilních fází obou systémů. Tento efekt jsme potlačili převáděním malého objemu z první dimenze, kde byla kolona s vnitřním průměrem 0,5 mm s průtokem několik mikro litrů za minutu, do druhé dimenze s kolonou s povrchově porézními částicemi a maximálním možným průtokem mobilní fáze.	2D kapalinová chromatografie; HILIC; gradientová eluce; fenolické látky.
eng	Optimization of Comprehensive Two-Dimensional Gradient Chromatography Coupling In-Line Hydrophilic Interaction and Reversed Phase Liquid Chromatography	In-line coupled comprehensive HILIC×RP systems should offer larger selectivity differences and better two-dimensional orthogonality than coupled RP×RP systems. However, this may not apply for all systems. The HILIC selectivity depends on the mix of selective polar and non-polar interactions with the functional groups, but also with the matrix of polar columns and depends on the sample type. We synthesized a new polar monolithic sulfobetaine polymethacrylate capillary column with excellent efficiency for low-molecular compounds. When used in the first, HILIC dimension coupled to core–shell or monolithic RP columns in the second dimension, this column provides much improved ortogonality for two-dimensional separations of phenolic and flavonoid compounds, in comparison to silica-bonded Diol, Polyethylene glycol or Zwitterionic columns. We investigated the performance of 11 short 5 cm and 3 cm columns for fast (1–2 min) gradient second-dimension separations. Band broadening or distortion may occur in directly coupled comprehensive HILIC×RP systems, due to strong solvent-strength differences between the mobile phases used in the first and in the second dimension. To suppress this effect, low fraction volumes were collected from a 0.5 mm I.D. capillary monolithic sulfobetaine column at the flow-rate of a few microliters per min, coupled in-line with various core–shell columns operated at the maximum flow-rate. This setup with simultaneous gradient elution in the HILIC and in the RP dimension provided successful separation of natural antioxidants.	Two-dimensional liquid chromatography; HILIC; Gradient elution; Phenolic compounds.

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte