Publikace detail

An assay of total glutathione and glutathione disulfide in human whole blood and plasma using a high-performance liquid chromatography with fluorescence detection

Autoři: Kanďár Roman | Vrbová Martina | Čandová Jarmila

Rok: 2013

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies

Název nakladatele: Taylor & Francis Ltd.

Místo vydání: Abingdon

Strana od-do: 2013-2028

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Stanovení celkového glutathionu a glutathiondisulfidu v lidské plné krvi a plazmě metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí	Je zde popsána metoda pro stanovení celkového glutathionu a glutathiondisulfidu v lidské plné krvi a plazmě s ohledem na vhodnou přípravu vzorků zabraňující oxidaci glutathionu a hydrolýze glutathiondisulfidu. Vzorky plné krve byly získány od skupiny dobrovolných dárců krve. Po odpovídající přípravě vzorků byl glutathion derivatizován ortho-ftaldialdehydem na stabilní, vysoce fluoreskující tricyklický derivát. Pro separaci byla použita kolona s reverzní fází a efluent byl monitorován fluorescenčním detektorem. Analytické parametry metody byly vyhovující. Hodnoty variačních koeficientů přesnosti v sérii a mezi sériemi byly pod 10 %. Výtěžnost metody pro celkový glutathion v plné krvi byl 96,1% (CV 1,4%), glutathiondisulfid v plné krvi 104,3% (CV 2,4%), celkový glutathion v plazmě 92,3% (CV 2,4%) a glutathiondisulfid v plazmě 107,4% (CV 2,6%). Nenalezli jsme mezi ženami a muži statisticky význam rozdíl v hladinách celkového glutathionu a glutathiondisulfidu. Vyvinuli jsme selektivní vysokoúčinnou kapalinovou chromatografii pro stanovení celkového glutathionu a glutathiondisulfidu v plné krvi a plazmě. Propracovaná příprava vzorku zabraňuje oxidaci glutathionu a hydrolýze glutathiondisulfidu.	dithiothreitol; glutathion; glutathiondisulfid; HPLC s fluorescenční detekcí; ortho-ftaldialdehyd; oxidační stres; deproteinační činidla
eng	An assay of total glutathione and glutathione disulfide in human whole blood and plasma using a high-performance liquid chromatography with fluorescence detection	A method is described here for the determination of total glutathione and glutathione disulfide in human whole blood and plasma with a suitable sample preparation procedure to prevent glutathione oxidation and glutathione disulfide hydrolysis. Whole blood samples were obtained from a group of blood donors. After adequate sample preparation, the samples were derivatized with ortho-phthaldialdehyde to form a stable, highly fluorescent tricyclic derivative. Reverse-phase column chromatography was used for the separation and fluorimetric detection to monitor the effluent. The analytical performance of this method was satisfactory for the determination of total glutathione and glutathione disulfide. The intra-assay and inter-assay coefficients of variation were below 10%. The recoveries were as follows: 96.1% (CV 1.4%) and 104.3% (CV 2.4%) for whole blood, 92.3% (CV 2.4%) and 107.4% (CV 2.6%) for plasma. We found no significant differences in both total glutathione and glutathione disulfide concentration between the women and men. We developed a selective high-performance liquid chromatography method for the determination of total glutathione and glutathione disulfide in human whole blood and plasma. Our sophisticated sample preparation procedure prevents significant glutathione oxidation and glutathione disulfide hydrolysis.	dithiothreitol; glutathione; glutathione disulfide; high-performance liquid chromatography with fluorescence detection; ortho-phthaldialdehyde; oxidative stress; protein precipitants

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte