Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Assay of total glutathione and glutathione disulphide in seminal plasma of male partners of couples presenting for a fertility evaluation
Autoři: Kanďár Roman | Hájková Nikola
Rok: 2014
Druh publikace: článek v odborném periodiku
Název zdroje: Andrologia
Název nakladatele: Wiley-Blackwell
Strana od-do: 1079-1088
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Stanovení celkového glutathionu a glutathiondisulfidu v seminální plazmě mužů páru sledovaného pro neplodnost Je popsána metoda pro stanovení celkového glutathionu (TGSH) a glutathiondisulfidu (GSSG) v seminální plazmě mužů páru sledovaného pro neplodnost. Je diskutována vhodná příprava vzorku před analýzou vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Po adekvátní přípravě vzorku, byl vzorek derivatizován ortho-ftaldialdehydem za vzniku stabilního a vysoce fluoreskujícího tricyklického derivátu. Pro separaci byla využita kapalinová chromatografie na obrácených fázích a efluent byl monitorován fluorescenčním detektorem (excitace 350 nm, emise 420 nm). Analytické parametry metody byly vyhovující. Variační koeficienty nepřesnosti byly pod 10 %. Výtěžnost metody byla 94,1 % (CV 2,3 %) pro TGSH a 93,2 % (CV 4,0 %) pro GSSG. Nebyly nalezeny žádné signifikantní rozdíly v koncentracích TGSH a GSSG mezi kuřáky a nekuřáky (2,07 ± 1,28 μM versus 1,56 ± 1,20 μM, P = 0,431 and 95 ± 56 nM versus 112 ± 138 nM, P = 0,825). antioxidanty; glutathio; glutathiondisulfid; lidská seminální plazma; neplodnost; oxidační stres
eng Assay of total glutathione and glutathione disulphide in seminal plasma of male partners of couples presenting for a fertility evaluation A method is described here for the determination of total glutathione (TGSH) and glutathione disulphide (GSSG) in the seminal plasma of the male partners of couples requesting a fertility evaluation. A suitable sample preparation procedure prior to high-performance liquid chromatography analysis is discussed. After adequate sample preparation, the samples were derivatised with ortho-phthaldialdehyde to form a stable, highly fluorescent tricyclic derivative. Reversed-phase column chromatography was used for the separation, and the effluent was monitored with a fluorescence detector at an excitation wavelength of 350 nm and an emission wavelength of 420 nm. The analytical performance of this method was satisfactory. The intra-assay and inter-assay coefficients of variation were below 10%. The recoveries were as follows: 94.1% (CV 2.3%) for TGSH and 93.2% (CV 4.0%) for GSSG. No significant differences were found in either TGSH or GSSG concentration between the smokers and nonsmokers (2.07 ± 1.28 μM versus 1.56 ± 1.20 μM, P = 0.431 and 95 ± 56 nM versus 112 ± 138 nM, P = 0.825). antioxidants; glutathione; glutathione disulphide; human seminal plasma; infertility; oxidative stress