Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Electrochemical determination of activity of acetylcholinesterase immobilized on magnetic particles
Autoři: Kostelník Adam | Čegan Alexander | Pohanka Miroslav
Rok: 2016
Druh publikace: článek v odborném periodiku
Název zdroje: International Journal of Electrochemical Science
Strana od-do: 4840-4849
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Elektrochemické stanovení aktivity acetylcholinesterasy imobilizované na magnetických částicích Acetylcholinesterasa (AChE) je enzym ukončující přenos vzruchů v cholinergním systému. Aktivita enzymu se běžně vyšetřuje Ellmanovou metodou, která má ovšem nedostatky jako je nestabilita použitých reagencií. Další nevýhodou je neschopnost využít enzym znovu. Proto jsme vyvinuli proces využívající EDC pro imobilizaci AChE na povrch magnetických částic, které nabízejí možnost separovat enzym a znovu jej využít. Pro stanovení enzyové aktivity jsme optimalizovali metodu square wave voltametrie za použití tištěných elektrod modifikovaných Pruskou modří. Pro testovaný inhibitor AChE, takrin, jsme získali detekční limit 8,1 μM. V porovnání se standardní Ellmanovou metodou, imobilizovaný enzym má limitovanou citlivost k organickým rozpouštědlům. Acetylcholinesterasa; takrin; magnetické částice; tištěné elektrody; square wave voltametrie
eng Electrochemical determination of activity of acetylcholinesterase immobilized on magnetic particles Acetylcholinesterase (AChE) is an enzyme which terminates action of neurotransmitter acetylcholine in cholinergic system. Activity of enzyme is commonly assayed by Ellman´s method which has significant disadvantages like instability of reagents. Inability to use enzyme from the mixture repeatedly is another disadvantage. Therefore, we developed process using N-(3-dimethylaminopropyl)-N′-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDC) to immobilize AChE on the surface of magnetic particles, which enable to separate enzyme and use it repeatedly. To determinate activity of enzyme, we optimized square wave voltammetry (SWV) method where screen-printed sensor with Prussian blue (PB) modified working electrode was performed. We report limit of detection equal 8.1 μM for a tested inhibitor of AChE tacrine. Comparing to the standard Ellman´s test, the immobilized enzyme has limited sensitivity to interferences caused by organic solvents. The proposed method is readily to practical application. Acetylcholinesterase; tacrine; magnetic particles; screen-printed electrode; square wave voltammetry