Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Magnetic macroporous bead cellulose functionalised with recombinant hyaluronan lyase for controllable hyaluronan fragmentation
Autoři: Kašparová Jitka | Korecká Lucie | Pepeliaev Stanislav | Bílková Zuzana | Smirnou Dzianis | Velebny Vladimir | Česlová Lenka
Rok: 2018
Druh publikace: článek v odborném periodiku
Název zdroje: Process biochemistry
Název nakladatele: Elsevier Science
Místo vydání: Oxford
Strana od-do: 105-111
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Magnetická makroporézní perlová celulóza funkcionalizovaná rekombinantní Hyaluronan lyázou pro kontrolovanou fragmentaci hyaluronanu Kyselina hyaluronová je složkou extracelulární matrix s důležitým potenciálem pro biotechnologické a farmaceutické aplikace. Nicméně, imunologické účinky jsou silně ovlivněny její molekulovou hmotností. Proto je důležitá příprava produktů s kontrolovanou a přesně definovanou velikostí fragmentů, stejně jako využití mírných reakčních podmínek a eliminace nečistot. Připravili jsme biokompatibilní nosič založený na magnetické makroporézní perlové celulóze funkcionalizované Hyaluronan lyázou ze Streptococcus pneumoniae a optimalizovali jsme reakční podmínky. Enzym byl imobilizován na magnetickou makroporézní perlovou celulózu a zároveň na stejný nosič, ale modifikovaný kyselinou iminodioctovou, kde byl pro imobilizaci využit His-tag na molekule enzymu. Nosiče vykazují výborné skladovací a operační stability. Hyaluronan; Hyaluronan lyáza; Enzymová imobilizace; Magnetické částice
eng Magnetic macroporous bead cellulose functionalised with recombinant hyaluronan lyase for controllable hyaluronan fragmentation Hyaluronic acid (HA) is a component of the extracellular matrix with important potential for biotechnological and pharmaceutical applications. However, the immunological effects of HA are strongly molecular weight-dependent; therefore, production of HA for therapeutic purposes requires control over the molecular weight of the product, as well as mild reaction conditions and elimination of bioactive impurities. Here, we produced and characterised biocompatible magnetic macroporous bead cellulose (MBC) functionalised with Streptococcus pneumoniae hyaluronan lyase (SpnHL) that are compatible with these requirements and optimised their reaction and storage conditions. Immobilisation of SpnHL on MBC via reductive amination or MBC with fixed iminodiacetic acid (MBC-IDA) via a His(8)-tag had minimal impact on its catalytic activity. The MBC-IDA-SpnHL carrier showed excellent operational and storage stability, and both carriers enabled reproducible time-controlled fragmentation of highly viscous HMW HA solutions, yielding HA fragments of appropriate molecular weight. Thus, these carriers are suitable for numerous industrial and biotechnological applications. Hyaluronan; Hyaluronan lyase; Enzyme immobilisation; Magnetic beads