Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

An overview of apoptosis assays detecting DNA fragmentation
Rok: 2018
Druh publikace: článek v odborném periodiku
Název zdroje: Molecular Biology Reports
Název nakladatele: Springer
Místo vydání: Heidelberg
Strana od-do: 1469-1478
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Přehled metod pro detekci DNA fragmentace u apoptózy Apoptóza byla rozpoznána jako typ programované buněčné smrti související s morfologickými a biochemickými změnami v buňkách. Tato naprogramovaná buněčná smrt hraje důležitou roli v genezi řady fyziologických a patologických procesů. Může být velmi důležité detekovat známky apoptózy ve studii buněčného metabolismu, kdy je DNA fragmentace jeden z nejvíce specifických nálezů apoptózy. K dnešnímu dni byly vyvinuty tři rutinní testy detekující fragmentaci DNA: DNA ladder, TUNEL a kometový test. Všechny tyto metody se liší v jejich přístupu k detekci fragmentace DNA. Test DNA ladder detekuje charakteristický DNA žebřík, který vzniká při internukleosomálním štěpení DNA. TUNEL (terminální deoxynukleotidyltransferáza-Nick Ending Labeling) test detekuje DNA zlomy pomocí terminální deoxynukleotidyltransferázou katalyzovaném připojení modifikovaných deoxynukleotidů na zlomy řetězce DNA. Kometový test může být použit pro detekci poškození jádra vedoucímu k jednoduchým/dvojitým zlomům DNA. Cílem tohoto review je popsat současné znalosti o těchto třech metodách, včetně optimalizovaných přístupů, technik a omezení. Apoptóza; DNA fragmentace; metody apoptózy; DNA žebřík; TUNEL; Comet.
eng An overview of apoptosis assays detecting DNA fragmentation Apoptosis has been recognized as a type of programmed cell death connected with characteristic morphological and biochemical changes in cells. This programmed cell death plays an important role in the genesis of a number of physiological and pathological processes. Thus, it can be very important to detect the signs of apoptosis in a study of cellular metabolism. The present paper provides an overview of methods often being used for detecting DNA fragmentation as one of the most specific findings in apoptosis. To date, three routine assays have been developed for detecting DNA fragmentation: DNA ladder assay, TUNEL assay, and comet assay. All these methods differ in their principles for detecting DNA fragmentation. DNA ladder assay detects the characteristic "DNA ladder" pattern formed during internucleosomal cleavage of DNA. Terminal deoxynUcleotidyl transferase Nick-End Labeling (TUNEL) assay detects DNA strand breaks using terminal deoxynucleotidyl transferase catalyzing attachment of modified deoxynucleotides on the DNA strand breaks. Comet assay can be used for detecting nucleus breakdown producing single/double-strand DNA breaks. The aim of this review is to describe the present knowledge on these three methods, including optimized approaches, techniques, and limitations. Apoptosis; DNA fragmentation; Apoptosis assays; DNA ladder; TUNEL assay; Comet assay