Univerzita Pardubice Fakulta chemicko- technologická

Univerzita Pardubice

Zaměstnanci
|
Studenti
English

Publikace detail

Využití RP-UHPLC/MS pro vysoce spolehlivou identifikaci lipidů v lidské plazmě

Autoři: Vaňková Zuzana | Peterka Ondřej | Chocholoušková Michaela | Wolrab Denise | Jirásko Robert | Holčapek Michal

Rok: 2021

Druh publikace: ostatní - přednáška nebo poster

Strana od-do: nestránkováno

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Využití RP-UHPLC/MS pro vysoce spolehlivou identifikaci lipidů v lidské plazmě	Lipidomika si klade za cíl porozumět lipidovým strukturám a jejich funkcím v biologických systémech. Analýza lipidů je založena především na hmotnostní spektrometrii (MS) buď s přímou infuzí nebo napojenou na separační techniky, typicky s elektrosprejovou ionizací (ESI). Při ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografii (RP-UHPLC) s obrácenou fází závisí retence lipidových druhů na délce tukových acylových řetězců, počtu a poloze dvojných vazeb. Cílem této práce byl vývoj metody RP-UHPLC/MS pro vysoce spolehlivou identifikaci velkého počtu lipidů z více lipidových tříd v lidské plazmě. Metoda RP-UHPLC/MS použila kolonu C18 se sub-2-μm částicemi s celkovou dobou analýzy 25 min. Identifikační přístup byl založen na: a) hodnotách m/z, kde úplný sken a tandemová hmotnostní spektra byla měřena s využitím vysokého rozlišení hybridního analyzátoru kvadrupól – analyzátor doby letu v obou ESI režimech polarity s vysokou hmotnostní přesností (v režimu úplného skenu), b) charakteristických fragmentových iontech v MS/MS a c) pravidelnosti v chromatografických retenčních závislostech pro jednotlivé lipidy. Tato kritéria poskytují velmi vysokou úroveň spolehlivosti pro hlášené identifikace lipidů, včetně regioizomerních a jiných izobarických forem. Retenční chování jednotlivých homologních lipidových řad, podporující správnou identifikaci, bylo navíc ověřeno pomocí grafů závislostí retenčních časů na počtu uhlíků nebo počtu dvojných vazeb v mastných acylových řetězcích. Celkem bylo identifikováno 503 lipidů v 26 polárních a nepolárních lipidových třídách ve standardním referenčním materiálu NIST 1950 lidské plazmy.