Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Spojení hydrofilní interakční kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií pro rozlišování izomerních tříd sfingolipidů v lidské plazmě
Rok: 2022
Druh publikace: ostatní - přednáška nebo poster
Strana od-do: nestránkováno
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Spojení hydrofilní interakční kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií pro rozlišování izomerních tříd sfingolipidů v lidské plazmě Lipidomika je individuální oblastí metabolomiky, která se zaměřuje na analýzu a popis lipidů izolovaných z buněk, tělních tekutin, tkání a dalších biologických vzorků. Lipidy jsou důležité endogenní biomolekuly a podílejí se na mnoha biochemických procesech ve všech eukaryotických organismech. Sfingolipidy obsahují sfingoidní báze a v závislosti na polaritě jiných substitucí se dělí na polární a nepolární třídy. V poslední době byl u nádorových onemocnění pozorován změněný metabolismus sfingolipidů a jejich analýza je stále populárnější s cílem nalézt potenciální nádorové biomarkery. Pro oddělení jednotlivých tříd sfingolipidů a získání spolehlivých dat v rámci měření velkých klinických kohort je však nutné použít vysoce účinnou robustní metodu. V naší práci byla vyvinuta hydrofilní interakční kapalinová chromatografie – hmotnostní spektrometrie (HILIC/MS) pro identifikaci a kvantifikaci širokého spektra sfingolipidů ve vzorcích lidské plazmy. Optimalizace chromatografických podmínek zahrnovala výběr kolony, složení mobilní fáze, vhodný gradient, průtokovou rychlost a koncentraci pufru s cílem dosáhnout nejlepšího chromatografického rozlišení. Nejlepší rozlišení poskytla kolona Acquity UPLC BEH HILIC (150 × 2,1 mm; 1,7 μm). Zvláštní pozornost byla věnována rozlišení izomerních tříd, například glukosylceramidů od galaktosylceramidů a laktosylceramidů od digalaktosylceramidů. Optimalizovaná a validovaná metoda byla použita ke kvantifikaci sfingolipidů ve standardním referenčním materiálu NIST SRM 1950 (NIST plasma). Více než 100 sfingolipidů z 8 lipidových tříd bylo kvantifikováno během 12 min analýzy v NIST plazmě na základě jejich retenčního času v režimu HILIC, vysoké přesnosti hmotnosti a fragmentačního chování MS/MS. Lipidomika; sfingolipidy; izomery; plazma; hmotnostní spektrometrie; HILIC