Publikace detail

Determination of selected alpha-keto acids in dried blood samples using HPLC with fluorescence detection

Autoři: Kanďár Roman | Kopčil Michal | Laštovičková Lenka

Rok: 2022

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis

Název nakladatele: Elsevier Science Inc.

Místo vydání: New York

Strana od-do: 114738

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Stanovení vybraných α-oxokyselin ve vzorcích suché krve metodou HPLC s fluorescenční detekcí	Stanovení α-oxokyselin odvozených od aminokyselin je v současnosti nejspolehlivějším přístupem pro diagnostiku některých vrozených metabolických onemocnění. Byla vyvinuta metoda HPLC pro simultánní stanovení vybraných α-oxokyselin ve vzorcích suché kapky krve. Vzorky suché krve byly získány od skupiny dárců krve, krev byla spotována na odběrový filtrační papír #903. Před separací byly α-oxokyseliny derivatizovány s 1,2-diamino-4,5-dimethoxybenzenem na odpovídající 3-substituované-6,7-dimethoxy-2(1H)-chinoxalinolové deriváty. K separaci byla použita kolona s reverzní fází Lichro-Cart 125-4, Purospher RP-18e, 5 μm. Pro gradientovou eluci derivátů α-oxokyselin byla použita směs 25% ACN v deionizované vodě (mobilní fáze A) a 100% ACN (mobilní fáze B). Analytické parametry této metody jsou pro všechny α-oxokyseliny vyhovující. Koeficienty variace přesnosti v sérii a mezi sériemi byly pod 10 % a výtěžnost se blížila 100 %. Vyvinuli jsme poměrně jednoduchou, rychlou, selektivní a dostatečně citlivou metodu HPLC s fluorescenční detekcí pro stanovení vybraných α-oxokyselin ve vzorcích suché krve. Prezentovaná metoda je vhodná pro účely klinického testování.	α-oxokyseliny; suchá kapka krve; HPLC s fluorescenční detekcí; 1,2-diamino-4,5-dimethoxybenzen
eng	Determination of selected alpha-keto acids in dried blood samples using HPLC with fluorescence detection	The determination of alpha-keto acids derived from amino acids is currently the most reliable approach for the diagnosis of some congenital metabolic diseases. An HPLC method for the simultaneous measurement of selected alpha-keto acids in dried blood samples has been developed and evaluated. Blood spot samples from a group of healthy blood donors were collected onto #903 Specimen Collection Paper. Prior the separation, the alpha-keto acids were derivatized with 1,2-diamino-4,5-dimethoxybenzene to the corresponding 3-substituted-6,7-dimethoxy-2 (1 H)-quinoxalinol derivatives. For the separation, a reverse-phase column LichroCart 125-4, Purospher RP-18e, 5 mu m, was used. The mixture of 25% ACN in deionized water (mobile phase A) and 100% ACN (mobile phase B) were used for a gradient elution of alpha-keto acids derivatives. Analytical performance of this method is satisfactory for all alpha-keto acids. The intra-assay and inter-assay coefficients were below 10% and recoveries were close to 100%. We have developed relatively simple, rapid, selective and sufficiently sensitive HPLC method with fluorescence detection for the determination of selected alpha-keto acids in dried blood samples. The presented method is suitable for clinical testing purposes.	alpha-Keto acids; Dried blood spot; HPLC with fluorescence detection; 1,2-Diamino-4,5-dimethoxybenzene

Search

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte