Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Ultrahigh-Performance Supercritical Fluid Chromatography-Mass Spectrometry in the Clinical Lipidomic Analysis
Autoři: Peterka Ondřej | Wolrab Denise | Jirásko Robert | Kanásová Mária | Dolečková Zuzana | Holčapek Michal
Rok: 2024
Druh publikace: kapitola v odborné knize
Název zdroje: Clinical Metabolomics : Methods and Protocols
Název nakladatele: Humana Press
Místo vydání: Totowa
Strana od-do: 305-314
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze Ultravýkonná superkritická fluidní chromatografie s hmotnostní spektrometrií v klinické lipidomické analýze Metoda ultravýkonné superkritické fluidní chromatografie s hmotnostní spektrometrií (UHPSFC/MS) byla optimalizována pro vysoce průtočné kvantitativní stanovení lipidů v lidském séru a plazmě s důrazem na robustnost a přesné kvantitativní měření. Pro separaci 17 nepolárních a polárních lipidových tříd byla použita kolona ze siliky s hybridní etylenovou vazbou (BEH) o rozměrech 100 × 3 mm a velikosti částic 1,7 μm. Separace lipidových tříd pomocí UHPSFC/MS umožňuje koeuci všech lipidových složek v rámci jedné lipidové třídy v jednom chromatografickém píku, včetně dvou exogenních interních standardů (IS) na lipidovou třídu, což poskytuje optimální podmínky pro robustní kvantifikaci. Metoda byla validována podle doporučení Evropské lékové agentury (EMA) a Úřadu pro kontrolu potravin a léčiv (FDA). Kombinace UHPSFC/MS se softwarem LipidQuant umožňuje semiautomatizovaný proces stanovení koncentrací lipidů s celkovým časem analýzy pouhých 8 minut včetně ekvilibrace kolony, což umožňuje analyzovat až 160 vzorků denně. Ultravýkonná chromatografie; Superkritická fluidní chromatografie; Chromatografie s hmotnostní spektrometrií; Klinická lipidomická analýza
eng Ultrahigh-Performance Supercritical Fluid Chromatography-Mass Spectrometry in the Clinical Lipidomic Analysis Ultrahigh-performance supercritical fluid chromatography–mass spectrometry (UHPSFC/MS) method is optimized for the high-throughput quantitation of lipids in human serum and plasma with an emphasis on robustness and accurate quantitation. Bridged ethylene hybrid (BEH) silica column (100 × 3 mm; 1.7 μm) is used for the separation of 17 nonpolar and polar lipid classes in 4.4 min using the positive ion electrospray ionization mode. The lipid class separation approach in UHPSFC/MS results in the coelution of all lipid species within one lipid class in one chromatographic peak, including two exogenous internal standards (IS) per lipid class, which provides the optimal conditions for robust quantitation. The method was validated according to European Medicines Agency and Food and Drug Administration recommendations. UHPSFC/MS combined with LipidQuant software allows a semiautomated process to determine lipid concentrations with a total run time of only 8 min including column equilibration, which enables the analysis of 160 samples per day. Ultrahigh-Performance Chromatography; Supercritical Fluid; Chromatography-Mass Spectrometry; Clinical Lipidomic Analysis