Publikace detail

Novel Charge-Switch Derivatization Method Using 3-(Chlorosulfonyl)benzoic Acid for Sensitive RP-UHPLC/MS/MS Analysis of Acylglycerols, Sterols, and Prenols

Rok: 2025

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Analytical Chemistry

Název nakladatele: American Chemical Society

Místo vydání: Washington

Strana od-do: 7157-7164

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Nová metoda derivatizace s přepnutím náboje pomocí 3-(chlorosulfonyl)benzoové kyseliny pro citlivou analýzu acylglycerolů, sterolů a prenolů pomocí RP-UHPLC/MS/MS.	hemická derivatizace spočívá v reakci analytu s derivatizačním činidlem za účelem úpravy jeho struktury, čímž se zlepšuje tvar píků, chromatografické vlastnosti, strukturální analýza, ionizační účinnost a citlivost. Byla vyvinuta nová metoda derivatizace využívající 3-(chlorosulfonyl)benzoovou kyselinu pro stanovení monoacylglycerolů, diacylglycerolů, volných sterolů a tokoferolů pomocí metody reverzní fáze ultra-vysoce výkonné kapalinové chromatografie ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií (RP-UHPLC/MS/MS) v režimu negativních iontů. Chromatografické a hmotnostně spektrometrické vlastnosti derivatizovaných lipidů byly zkoumány za použití 29 lipidových standardů ze čtyř lipidových tříd. Proces derivatizace byl optimalizován pomocí směsné plazmy doplněné o 9 vnitřních standardů, přičemž bylo dosaženo optimálního výtěžku při reakčním čase 40 minut při 60 °C. Byla potvrzena stabilita derivátů, přičemž krátkodobá stabilita byla udržena po dobu 10 hodin při 4 °C a dlouhodobá stabilita po dobu 5 dnů při -80 °C. Opakovatelnost a reprodukovatelnost byly ověřeny jedním nebo dvěma operátory, což potvrzuje jednoduchost a robustnost metody, a kalibrační křivky s vysokými koeficienty lineární regrese ilustrují přesnost metody. Tento derivatizační přístup, kombinující RP-UHPLC/MS/MS a využití specifických fragmentačních vzorců, významně snižuje limity detekce — pro volné steroly v plazmě dosahují hodnot 15–25 pmol/mL. Optimalizovaná metoda byla aplikována na analýzu lidské plazmy, což vedlo k identifikaci 92 lipidových druhů v cílových lipidových třídách. To představuje výrazné zlepšení citlivosti a detekčních schopností oproti dříve popsaným metodám.	tandemová hmotnostní spektrometrie; cholesterol; lipidomika; kvantifikace; oxysteroly; extrakce; izomery; onemocnění; lipidy
eng	Novel Charge-Switch Derivatization Method Using 3-(Chlorosulfonyl)benzoic Acid for Sensitive RP-UHPLC/MS/MS Analysis of Acylglycerols, Sterols, and Prenols	Chemical derivatization involves the reaction of an analyte with a derivatization agent to modify its structure, improving the peak shape, chromatographic performance, structural analysis, ionization efficiency, and sensitivity. A novel derivatization method using 3-(chlorosulfonyl)benzoic acid is developed for the determination of monoacylglycerols, diacylglycerols, free sterols, and tocopherols using the reversed-phase ultra-high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (RP-UHPLC/MS/MS) method in the negative ion mode. The chromatographic and mass spectrometric properties of derivatized lipids are investigated by using 29 lipid standards spanning four lipid classes. The derivatization process is optimized using pooled plasma spiked by 9 internal standards, achieving an optimal yield with a reaction time of 40 min at 60 degrees C. The stability of the derivatives is confirmed, with short-term stability maintained for 10 h at 4 degrees C and long-term stability preserved for 5 days at -80 degrees C. The repeatability and reproducibility are verified by one/two operator(s), which underscores the simplicity and robustness of the method, and calibration curves with high linear regression coefficients illustrate the accuracy of the method. The derivatization approach, which combines RP-UHPLC/MS/MS and the use of specific fragmentation patterns, significantly reduces limits of detection, reaching 15-25 pmol/mL for free sterols in plasma. The optimized method is applied to the analysis of human plasma, leading to the identification of 92 lipid species in the targeted lipid classes. This represents a substantial improvement in sensitivity and detection capabilities compared to those of previously reported methods.	tandem mass-spectrometry; cholesterol; lipidomics; quantification; oxysterols; extraction; isomers; disease; lipids

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte