Publikace detail

Enhancing metabolite coverage using dedicated mobile phases for individual polarity modes in HILIC-MS

Rok: 2025

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Analytical and Bioanalytical Chemistry

Strana od-do: 747-757

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Zlepšení pokrytí metabolitů pomocí specializovaných mobilních fází pro jednotlivé polarity v HILIC-MS	Vyvinuli jsme novou metodu hydrophilní interakční kapalinové chromatografie spojené s hmotnostní spektrometrií (HILIC-MS) s mobilními fázemi optimalizovanými pro široké pokrytí metabolitů v jednotlivých polaritních módech. Tato strategie se dvěma mobilními fázemi rozšiřuje spektrum anotovaných metabolitů a zlepšuje jistotu jejich identifikace, což vede k širším a přesnějším metabolickým profilům. Začlenění bioinertního chromatografického systému dále zvyšuje citlivost. Kolona s bridged ethyl hybrid (BEH) amidovou stacionární fází poskytuje ze tří porovnávaných kolon nejlepší výsledky pro metabolomickou analýzu. Vývoj metody zahrnuje zkoumání vlivu složení mobilní fáze, pH a přídavku medronové kyseliny na odezvu MS v bioinertních chromatografických podmínkách. Výsledky zdůrazňují důležitou roli alkalického pH pro citlivou detekci polyfosforylovaných metabolitů a zároveň ukazují, že chelatační aditiva jsou v plně bioinertním systému nadbytečná. Nakonec je optimalizovaná metoda aplikována na vzorky myší plazmy, pankreatu a jater, aby byla prokázána její univerzálnost a spolehlivá výkonnost v komplexních biologických matricích, čímž se potvrzuje jako výkonný nástroj pro jisté a reprodukovatelné metabolomické studie.	metabolity; mobilní fáze; HILIC-MS
eng	Enhancing metabolite coverage using dedicated mobile phases for individual polarity modes in HILIC-MS	We have developed a new hydrophilic interaction liquid chromatography-mass spectrometry (HILIC-MS) method with mobile phases optimized for high metabolite coverage in individual polarity modes. This dual mobile phase strategy expands the range of annotated metabolites and improves identification confidence, providing broader and more accurate metabolic profiles. The incorporation of a bioinert chromatographic system further enhances sensitivity. The bridged ethyl hybrid (BEH) amide column yields the best results for metabolomic analysis among the three chromatographic columns in this comparison. The method development involves investigating the effects of mobile phase composition, pH, and a medronic acid additive on the MS response under bioinert chromatographic conditions. The results highlight the important role of alkaline pH for the sensitive detection of polyphosphorylated metabolites, while demonstrating the redundancy of chelating additives in a fully bioinert system. Finally, the optimized method is applied to mouse plasma, pancreas, and liver samples to demonstrate its versatility and reliable performance in complex biological matrices, establishing it as a powerful tool for confident and reproducible metabolomics studies.	metabolites; mobile phases; HILIC-MS

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte