Publikace detail

NOVÁ DERIVATIZAČNÍ METODA VYUŽÍVAJÍCÍ KYSELINU 3 (CHLOROSULFONYL)BENZOOVOU PRO ANALÝZU ACYLGLYCEROLŮ, STEROLŮ A PRENOLŮ METODOU RP-UHPLC/MS/MS V NEGATIVNÍM IONTOVÉM MÓDU

Rok: 2025

Druh publikace: ostatní - přednáška nebo poster

Strana od-do: nestránkováno

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	NOVÁ DERIVATIZAČNÍ METODA VYUŽÍVAJÍCÍ KYSELINU 3 (CHLOROSULFONYL)BENZOOVOU PRO ANALÝZU ACYLGLYCEROLŮ, STEROLŮ A PRENOLŮ METODOU RP-UHPLC/MS/MS V NEGATIVNÍM IONTOVÉM MÓDU	Spojení chromatografických technik a hmotnostní spektrometrie (MS) představuje klíčový přístup pro analýzu lipidů. Velmi selektivní a citlivou analýzu poskytuje zejména MS s nízkým rozlišením, která využívá specifické přechody analytů například multiple reaction monitoring (MRM). Přestože mohou být tyto přechody velmi selektivní, nelze jimi rozlišit některé izomery lipidů. Tento nedostatek lze překonat pomocí kapalinové chromatografie v systémech s obracenými fázemi (RP-LC) a díky této kombinaci je možné spolehlivě identifikovat a kvantifikovat větší množství lipidů. Některé třídy lipidů však tímto přístupem nejsou dobře analyzovatelné, protože během ionizace fragmentují nebo netvoří dostatečně selektivní fragmenty. V těchto případech je možné využití derivatizačních metod, které mohou zlepšit chromatografické vlastnosti, ionizační účinnost, stabilitu analytu nebo selektivitu a citlivost stanovení. V této práci jsme vyvinuli novou derivatizační metodu využívající 3-(chlorosulfonyl)benzoovou kyselinu, která dosud nebyla pro derivatizaci použita. Cílem bylo umožnit analýzu sterolů, prenolů a neutrálních lipidů v negativním iontovém módu, čímž se minimalizuje fragmentace v iontovém zdroji v porovnání s běžnou ionizací v pozitivním módu, a výrazně se tak zvyšuje citlivost analýzy. Metoda RP-UHPLC/MS/MS byla optimalizována na základě 30 derivatizovaných standardů ze čtyř lipidových tříd (steroly, prenoly, monoacylglyceroly a diacylglyceroly). RP-UHPLC metoda umožnila separaci izomerů (např. 1,2-DG vs. 1,3-DG, cholesterol vs. lathosterol nebo desmosterol vs. 7-dehydrocholesterol) a v kombinaci s hmotnostní spektrometrií umožnila vysoce citlivou a selektivní analýzu. Derivatizační reakce byla optimalizována za použití lidské plazmy s přídavkem devíti vnitřních standardů ze čtyř různých tříd lipidů. Nejvyšší výtěžek reakce byl dosažen při molárním poměru pyridinu k derivatizačnímu činidlu 6:1, při 60 °C po 40 minut. Přebytek pyridinu a derivatizačního	DERIVATIZACE; KYSELINA CHLOROSULFONYLBENZOOVÁ; STEROLY; RP-UHPLC/MS/MS

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte