Publikace detail

Efficient isolation of carbonyl-reducing enzymes using affinity approach with anticancer drug oracin as a specific ligand

Rok: 2013

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Journal of Separation Science

Název nakladatele: Wiley-VCH

Místo vydání: Weinheim

Strana od-do: 1176-1184

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Efektivní izolace karbonyl-redukujících enzymů pomocí afinitního nosiče s protinádorovým lékem oracinem jako specifickým ligandem	Karbonyl-redukující enzymy jsou důležité jak pro metabolismus endogenních látek, tak i pro biotransformaci xenobiotik. Ke studiu jejich role v metabolismu je nutné získat dostatečné množství těchto enzymů v nativní formě. Proto je nezbytné zavedení účinné izolační a purifikační strategie. Oracin, perspektivní protinádorový lék je jedním z xenobiotických substrátů pro karbonyl-redukující enzymy. V této práci je popsán nový přístup izolace a purifikace karbonyl-redukujících enzymů založený na principu molekulárního rozpoznávání s oracinem jakožto ligandem. Pro zavedení úspěšné purifikační strategie je nezbytné zachování sterické přístupnosti ligandu a proto byl během přípravy afinitního nosiče zohledněn typ kovalentní vazby, orientace molekul ligandu a jejich vzdálenost od matrice. Jako matrice byly využity komerčně dostupné magnetické mikročástice a účinnost připravených nosičů byla hodnocena pomocí účinnosti izolace rekombinantních enzymů AKR1C3 a CBR1. Požadovaných parametrů a vysoké úspěšnosti izolace a purifikace bylo dosaženo u nosiče s N-alkylovaných oracinem navázaným na magnetických mikročásticích SiMAG-COOH přes raménko BAPA.	afinita; karbonyl; megnetické mikročástice; oracin; reduktáza
eng	Efficient isolation of carbonyl-reducing enzymes using affinity approach with anticancer drug oracin as a specific ligand	Carbonyl-reducing enzymes are important in both metabolism of endogenous substances and biotransformation of xenobiotics. Because sufficient amounts of native enzymes must be obtained to study their roles in metabolism, an efficient purification strategy is very important. Oracin (6-[2-(2-hydroxyethyl)aminoethyl]-5,11-dioxo-5,6-dihydro-11H-indeno[1,2-c]isoquinoline) is a prospective anticancer drug and one of the xenobiotic substrates for carbonyl-reducing enzymes. A new purification strategy based on molecular recognition of carbonyl-reducing enzymes with oracin as a ligand is reported here. The type of covalent bond, ligand molecules orientation, and their distance from the backbone of the solid matrix for good stearic accessibility were taken into account during the designing of the carrier. The carriers based on magnetically active microparticles were tested by recombinant enzymes AKR1C3 and CBR1. The SiMAG-COOH magnetic microparticles with N-alkylated oracin and BAPA as spacer arm provide required parameters: proper selectivity and specificity enabling to isolate the target enzyme in sufficient quantity, purity, and activity.	affinity; carbonyl; magnetic; oracin; reductase

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte